Apoptosis/Necroptosis Antibody Sampler Kit

背景

细胞凋亡是一种会导致细胞死亡的受调控生理过程 (1,2)。作为半胱氨酸蛋白酶的一族，半胱天冬酶是细胞凋亡的中心调节分子。 caspase 被合成为失活酶原，酶原包括前肽结构域和经 caspase 活性级联蛋白水解加工的大亚基 (p20) 和小亚基 (p10)。起始半胱天冬酶（包括8、9、10 和 12）可与促凋亡信号紧密耦合。一旦被激活，这些 caspase 就裂解并激活下游效应子 caspase （包括 3、6 和 7），这些下游效应子 caspase 反过来裂解细胞骨架和胞核蛋白（如 PARP、α-fodrin、DFF 和 lamin A）并诱导细胞凋亡。线粒体释放的细胞色素 c 偶联激活的 caspase-9，caspase-9 是一种关键起始因子 caspase。通过涉及肿瘤坏死因子受体超家族死亡受体的外源性机制所诱导的细胞凋亡会激活 caspase-8。激活的 caspase-8 会裂解并激活下游效应子 caspase ，如 caspase-1、-3、-6 和 -7。Caspase-3 是细胞凋亡的一个关键执行者，因为它部分负责或完全负责许多关键蛋白的溶蛋白性裂解，如核酶多（ADP-核糖）聚合酶 (PARP)。

坏死性凋亡是一个坏死性细胞死亡的调控通路，肿瘤坏死因子 (TNF) 家族的细胞因子、病原体感应蛋白（如 toll 样受体 (TLR)）和缺血性损伤等许多炎症信号都会诱发坏死性凋亡 (3,4)。caspase-8 介导的细胞凋亡会负向调节坏死性凋亡，在这种情况下，激酶 RIP/RIPK1 被裂解 (5)。此外，RIP 的小分子抑制剂 necrostatin-1 (Nec-1) 也会抑制坏死性凋亡 (6)。研究表明，坏死性凋亡会导致许多病理情况，并且 Nec-1 经证明可在缺血性脑损伤等模型中提供神经保护 (7)。RIP 在激酶结构域中对 Nec-1 敏感的多个位点被磷酸化，这些位点包括 Ser14、Ser15、Ser161 和 Ser166 (8)。磷酸化可促进与 RIP3 的结合，这是坏死性凋亡所必需的 (9-11)。混合谱系激酶结构域样蛋白 (MLKL) 是一个在坏死性凋亡通路中 RIP3 的下游靶标的假激酶 (12)。在坏死性凋亡中，RIP3 在 Ser227 位点被磷酸化，这会募集 MLKL 并导致其在 Thr357 和 Ser358 位点的磷酸化 (12)。通过多种机制敲除 MLKL 可抑制坏死性凋亡 (13)。细胞坏死性凋亡过程中 MLKL 的磷酸化导致其寡聚化并形成影响膜完整性的孔隙 (14-17)。