查看特别推荐 >>
5051
PDI (C81H6) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
抗体偶联物
单克隆抗体
  1. 产品
  2. 抗体偶联物
  3. PDI (C81H6) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
R
重组

PDI (C81H6) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #5051

引用 (7)
筛选器：
  1. IF
使用 PDI (C81H6) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)（绿色）和 β-Actin Mouse mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate)（红色），对 NIH/3T3 细胞进行免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
图像库
更多了解我们如何获得图像
To Purchase # 5051S
目录# 规格 价格 库存
5051S		 100 µl （50 次检测）

Bulk & Custom Formulation

支持性数据

反应性 H M R Mk
灵敏度 内源性
MW (kDa)
来源/同种型 兔 

应用关键词：

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词：

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • GP-豚鼠
  • Rab-Rabbit
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体与 Alexa Fluor® 488 荧光染料接合，并经内部测试，可用于人体细胞的直接免疫荧光分析。该抗体的物种交叉反应性预计与非偶联的 PDI (C81H6) Rabbit mAb #3501 相同。

产品使用信息

应用 稀释度
免疫荧光法（免疫细胞化学） 1:50

保存

保存在 PBS（pH 为 7.2）、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。4°C 保存。切勿分装抗体。避光。切勿冷冻。

实验步骤

打印

查看 > 收起 >

免疫荧光法（免疫细胞化学）

A. 溶液与试剂

注意：用反渗透去离子 (RODI) 水或等效净化水制备溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS)： (9808) 要制备 1L 1X PBS：添加 50 ml 20X PBS 至 950 ml dH2O 中并混合。调节 pH 至 8.0。
  2. 甲醛：16%，无甲醇，Polysciences 公司生产。（cat# 18814），使用新鲜制剂，小瓶打开后在 4°C 避光保存，同时在 1X PBS 中稀释使用。
  3. 甲醇，100%
  4. 封闭液 (1X PBS / 5% normal goat serum (#5425) / 0.3% Triton™ X-100)：要配制 10 ml：添加 0.5 ml normal goat serum 和 0.5 ml 20X PBS 到 9.0 ml dH2O 中，混匀。搅拌时加入 30 µl Triton™ X-100。
  5. 抗体稀释缓冲液 (1X PBS / 1% BSA / 0.3% Triton X-100)：要制备 10 ml，添加 30 µl Triton™ X-100 至 10 ml 1X PBS 中。充分混合后，添加 0.1 g BSA (9998)，并混合。
  6. Prolong® Gold AntiFade Reagent (#9071)，Prolong® Gold AntiFade Reagent with DAPI (#8961)。

B. 标本制备 - 培养细胞系 (IF-IC)

注意：细胞应当在多孔板、腔室玻片或盖玻片上直接培养、处理、固定和染色。

  1. 吸干液体，随后在细胞上覆盖一层 2–3 mm 用 1X PBS 稀释的 4% 甲醛。注意：甲醛有毒性，仅可在通风橱中使用
  2. 室温下固定细胞 15 分钟。
  3. 吸去固定液，用 1X PBS 漂洗三次，每次 5 分钟。
  4. 继续进行免疫染色操作（C 部分）。

C. 免疫染色

注意：所有随后的孵育都应当在室温下完成，除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育，以防止干燥和荧光物质淬灭。

  1. 甲醇通透步骤：在细胞上覆盖冰冷的 100% 甲醇（使用足够的甲醇完全覆盖至 3–5 mm，不要让其干燥），并在 –20°C 下用甲醇孵育 10 分钟，同时用 1X PBS 漂洗 5 分钟。
  2. 在封闭缓冲液中封闭标本 60 分钟。
  3. 封闭时，按产品网页中列出的抗体稀释缓冲液中稀释来制备一抗。
  4. 吸去封闭缓冲液，加入稀释后的一抗。
  5. 4°C 温度下孵育过夜。
  6. 用 1X PBS 漂洗三次，每次 5 分钟。
  7. 使用 Prolong® Gold Antifade Reagent (#9071) 以及带 DAPI (#8961) 的 Prolong® Gold AntiFade Reagent 盖住切片。
  8. 为达到最佳效果，立即以适当的激发波长检测标本。将切片平放避光 4°C 环境下，可长期保存。

发布​时间 2006 年 11 月

修订时间 2010 年 12 月

实验步骤编号：220

特异性/灵敏度

PDI (C81H6) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) 可检测内源水平的 PDI 总蛋白。

物种反应性：

人, 小鼠, 大鼠, 猴

来源/纯化

使用与人 PDI 的序列相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

在合成期间，分泌蛋白转位到内质网 (ER) 进行翻译后修饰和正确折叠。为了达到其天然构象，许多分泌蛋白需要分子间或分子内二硫键的形成 (1)。这个过程被称为氧化蛋白折叠。蛋白质二硫键异构酶 (PDI) 可催化这些二硫键的形成和异构化 (2)。氧化折叠机制的研究表明分子氧可氧化 ER 蛋白 Ero1，Ero1 可以通过双硫键氧化 PDI (3)。这个活动之后，PDI 催化折叠蛋白形成二硫键 (3)。

有限使用

除非如以 CST 合法授权代表签署的书面形式另行明确同意，否则以下条款适用于 CST、其附属公司或其分销商提供的产品。除非 CST 合法授权代表以书面形式单独接受，否则任何附加于或异于此处所载条款和条件的客户条款和条件均被拒绝且无效。

产品用“仅供研究使用”或类似标示声明标示，并且尚未经 FDA 或其他国外或国内监管实体出于任何目的批准、准许或许可。客户不得出于任何诊断或治疗目的或以任何与产品标示声明相冲突的方式使用任何产品。CST 销售或许可的产品提供给作为最终用户的客户，且仅用于研究和开发用途。出于诊断、预防或治疗目的任何产品使用或出于转售（单独或作为成分）或其他商业目的的任何产品购买都要求来自 CST 的单独许可。客户 (a) 不得向任何第三方出售、许可、出借、捐赠或另行转让或提供任何本公司产品，无论单独或联合其他材料方式，或使用本公司产品制造任何商业产品，(b) 不得复制、修改、逆向工程、反编译、反汇编或另行尝试发现本公司产品的底层结构或技术，或出于开发与 CST 产品或服务竞争的任何产品或服务的目的使用本公司产品，(c) 不得从本公司产品改变或移除任何商标、商品名称、徽标、专利或版权声明或标记，(d) 仅应根据 CST 产品销售条款和任何适用文档使用本公司产品，以及 (e) 应就客户联系本公司产品所用的任何第三方产品或服务而言遵守任何许可、服务条款或类似协议。

仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
本产品依据源于 Life Technologies Corporation 的知识产权许可提供。本产品的转让条件为买方仅在买方开展的研究中使用所购买的产品，不包括合同研究或任何服务收费研究，并且买方不得 (1) 将本产品或其组分用于以下方面：(a) 用于诊断、诊疗或预防目的；(b) 用于检测、分析或筛选服务或获得信息，以按检测收取报酬；或 (c) 用于制造或质量保证或质量控制，和/或 (2) 销售或转让本产品或其组分用于转售，无论是否转售供研究使用。如需了解有关购买本品用于除上述目的之外目的的许可信息，请联系 Life Technologies Corporation（地址：5791Van Allen Way, Carlsbad, CA 92008 USA）或 [受保护的电子邮件]。
第 7,429,487 号美国专利，外国对应物，以及由此而来的儿童专利。
所有其他商标均属各自所有者专有。访问我们的商标信息页面。