T Cell Signaling Antibody Sampler Kit

背景

当 T 细胞经 T 细胞受体 (TCR) 遭遇抗原时，抗原数量和性质信息将中继至胞内信号转导装置 (1)。该激活过程主要取决于直接与 TCR α 和 ß 链结合的多亚基蛋白复合体 CD3（分化抗原簇 3）。CD3 主要由四种多肽组成： ζ、γ、ε 和 δ。每一个多肽包含至少一个免疫受体基于酪氨酸激活域 (ITAM) 的区域 (2)。接受刺激时，Src 家族激酶 Lck 和 Fyn 被募集到 T 细胞受体 (TCR) 复合体，并激活下游酪氨酸激酶，以启动 T 细胞信号转导。Tyr394 的磷酸化则会增强 Lck 活性，而 Tyr505 在 Lck 羧基末端尾区的磷酸化则下调其催化活性 (3)。通过 Src 家族酪氨酸激酶的自磷酸化和转磷酸化，Zap-70 和 Syk 在几个酪氨酸残基上可以被快速磷酸化。Zap-70 在 Tyr493 与 Syk 在 Tyr526 的活化循环磷酸化可引起两种激酶被完全激活 (4)。其他酪氨酸残基在激酶结构域之间的 B 区域（包括 Zap-70 在 Tyr315 和 Zap-70 在 Tyr 319）内的后续磷酸化，为下游信号转导分子建立了锚定位点。在 SH2 结合基序内，在多个保守的酪氨酸残基位置，Zap-70 与 Syk 可以磷酸化跨膜接头蛋白 LAT，从而为下游信号转导靶标暴露这些基序用作锚定位点 (5,6)。LAT 在 Tyr171 与 Tyr220 位点磷酸化，可以促成 Grb2、Gads/SLP-76、PLCγ1 和 PI3 激酶结合。接头蛋白 SLP-76 在 Tyr113 和 Tyr128 位点磷酸化，可以促成 Grb2 样接头分子 Gads 的结合。SLP-76 在 Ser376 位点被造血祖细胞激酶 1 (HPK1) 磷酸化，可诱导与 14-3-3ε 产生交互作用并下调 TCR 信号转导 (7,8)。磷酸肌醇特异的磷脂酶 PLCγ1 酶活性还受到 Zap70 和 Syk 在 Tyr783、Tyr711 与 Tyr1253 位点磷酸化的刺激，导致 PI-4,5-P2 强力水解 (9)。