Name: T Cell Signaling Antibody Sampler Kit
Price: 669.00 EU
Availability: InStock

引用 (1)

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 1 — Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from serum-starved A431 cells treated with hEGF (100 ng/mL, 5 min.) using Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb #14008. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的单一靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:50（蓝线）和 1:250（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 2 — 使用 Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb（上）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下），对未经处理 (-) 或经 hPDGF-BB #8912 刺激（5分钟；+）的 NIH/3T3 细胞、未经处理 (-) 或经 hEGF #8916 刺激（5 分钟；+）的 A-431 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 3 — 使用 Phospho-SLP-76 (Ser376) (D9D6E) Rabbit mAb（上图）或 SLP-76 Antibody #4958（下图），对未经处理 (-) 或已经 H₂O₂（11 mM，1 分钟；+）处理的 Jurkat 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 4 — 使用 Phospho-Zap-70 (Tyr493)/Syk (Tyr526) Antibody（上图）或 Syk Antibody #12358（下图）对未经处理或已经 10 µg/ml IgM 处理 2 分钟，并且用或不用牛小肠磷酸酶 (CIP) 处理的 Ramos 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 5 — 使用 Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) (65E4) Rabbit mAb 对已经过氧化氢（2mM，2 分钟）或 λ 磷酸酶处理的 Jurkat 细胞的提取物以及已经抗人 IgM（12 mcg/ml，2 分钟）处理的 Ramos 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 6 — 使用 Phospho-Lck (Tyr505) Antibody（上）或对照 Lck Antibody #2752（下），对经小牛小肠碱性磷酸酶 (CIP) 或 H2O2 处理 (2 mM) 的 Jurkat 细胞（饥饿 16 小时）提取物进行蛋白质印迹分析。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 7 — 使用 Phospho-LAT (Tyr220) Antibody 对未经处理或隔夜血清饥饿后经抗 CD3 处理（10 µg/ml，2分钟）的人 Jurkat 细胞的 SDS 提取物进行蛋白质印迹分析。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 8 — 使用 CD3ε (CD3-12) Rat mAb，对来自 DND41 细胞和 Molt4 细胞的总细胞裂解物进行蛋白质印迹分析。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 9 — 使用 Phospho-Src Family (Tyr416) (D49G4) Rabbit mAb（上）或 Src (36D10) Rabbit mAb #2109（下），对血清饥饿或经人 Platelet-Derived Growth Factor BB hPDGF-BB #8912 处理（100 ng/ml，15 分钟）的 NIH/3T3 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 10 — 一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO^®，在酶催化分解期间发光。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 11 — 一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGlo^®，在酶催化分解期间发光。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 12 — 使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP^® Isotype Control #3900（泳道 2）或 Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb（泳道 3），对经 hEGF #8916 刺激的 A-431 细胞提取物 phospho-PLCγ1 (Tyr783) 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 13 — 使用 Phospho-SLP-76 (Ser376) (D9D6E) Rabbit mAb（上图）或 SLP-76 Antibody #4958（下图），对未经处理 (-) 或已经 H₂O₂（11 mM，1 分钟；+）处理的 EL4 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 14 — 使用 Phospho-Zap-70 (Tyr493)/Syk (Tyr526) Antibody（上图）或对照品 Zap-70 Antibody #2702（下图）对饥饿 16 小时且已经 2 mM H2O2 处理 3 分钟的 Jurkat 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 15 — 使用 Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) (65E4) Rabbit mAb（绿色）对未经处理（右图）或已经人 IgM（左图）处理的 Ramos 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。红色 = Propidium Iodide (PI)/RNase Staining Solution #4087。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 16 — 使用 Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) (65E4) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP^® Isotype Control #3900（虚线）对未经处理（蓝色）或已经过抗 IgM（12 ug/ml，2 分钟；绿色）处理的 Ramos 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')₂ Fragment (Alexa Fluor^® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit: Image 17 — 使用 Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP^® Isotype Control #3900（虚线），对未经处理（蓝色）或已经 mPDGFbb（200ng/ml，15 分钟；绿色）处理的 NIH/3T3 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')₂ Fragment (Alexa Fluor^® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

图像库

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To Purchase # 14541T

目录#	规格	价格	库存
14541T	1 个试剂盒（8 x 20 微升）

产品包括
相关产品

产品包括	数量	应用	反应性	MW (kDa)	同型
CD3ε (CD3-12) Rat mAb 4443	20 µl	WB IP	H M	21	大鼠 IgG1
Phospho-LAT (Tyr220) Antibody 3584	20 µl	WB IP	H	36, 38	兔
Phospho-Lck (Tyr505) Antibody 2751	20 µl	WB IP	H M	56	兔
Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb 14008	20 µl	WB IP F	H M	155	兔 IgG
Phospho-Src Family (Tyr416) (D49G4) Rabbit mAb 6943	20 µl	WB IP	H M R Mk	60	兔 IgG
Phospho-SLP-76 (Ser376) (D9D6E) Rabbit mAb 14745	20 µl	WB	H M	76	兔 IgG
Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) (65E4) Rabbit mAb 2717	20 µl	WB IF F	H M	70, 72	兔 IgG
Phospho-Zap-70 (Tyr493)/Syk (Tyr526) Antibody 2704	20 µl	WB IP	H	70	兔
Anti-rat IgG, HRP-linked Antibody 7077	100 µl	WB	R		山羊
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074	100 µl	WB	Rab		山羊

试剂盒使用信息

实验步骤

产品说明

T Cell Signaling Antibody Sampler Kit 提供了研究 T 细胞受体信号转导的高性价比手段。该试剂盒包含足量的一抗和二抗，每种一抗可进行 2 次蛋白质印迹实验。

特异性/灵敏度

除非另行说明，每种抗体将识别靶标蛋白的内在总水平，而修饰态的抗体将只能靶定指定残基位点磷酸化的靶标蛋白。由于具有高度的序列同源性，Phospho-Lck (Tyr505) Antibody 可与某些磷酸化的 Src 家族成员发生交叉反应。在同等位点磷酸化之后，Phospho-Src Family (Tyr416) (D49G4) Rabbit mAb 可与其他 Src 家族成员 (Lyn、Fyn、Lck、Yes 和 Hck) 发生交叉反应，并可与过表达的磷酸化RTKs 发生交叉反应。在 Tyr352 位点磷酸化之后，Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) (65E4) Rabbit mAb 可与内源水平的 Syk 发生交叉反应。在 Tyr526 位点磷酸化之后，Phospho-Zap-70 (Tyr493)/Syk (Tyr526) Antibody 可与内源水平的 Syk 发生交叉反应。

来源/纯化

使用与人 CD3ε 蛋白 Pro184 周围区域的残基相对应的合成肽，以及与人 PLCγ1 蛋白 Tyr783、人 Src 蛋白 Tyr416、人 SLP-76 蛋白 Ser376、人 Zap-70 蛋白 Tyr319 周围残基相对应的合成磷酸肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 LAT 蛋白 Tyr220、人 Lck 蛋白 Tyr505 、人 Zap-70 蛋白 Tyr493 周围残基相对应的合成磷酸肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。通过蛋白质 A 和肽亲和色谱纯化抗体。

背景

当 T 细胞经 T 细胞受体 (TCR) 遭遇抗原时，抗原数量和性质信息将中继至胞内信号转导装置 (1)。该激活过程主要取决于直接与 TCR α 和 ß 链结合的多亚基蛋白复合体 CD3（分化抗原簇 3）。CD3 由四种多肽组成：ζ、γ、ε 和 δ。这些多肽各自含有至少一个基于免疫受体酪氨酸的激活基序 (ITAM) (2)。接受刺激时，Src 家族激酶 Lck 和 Fyn 被募集到 T 细胞受体 (TCR) 复合体，并激活下游酪氨酸激酶，以启动 T 细胞信号转导。Tyr394 的磷酸化则会增强 Lck 活性，而 Tyr505 在 Lck 羧基末端尾区的磷酸化则下调其催化活性 (3)。通过 Src 家族酪氨酸激酶的自磷酸化和转磷酸化，Zap-70 和 Syk 在几个酪氨酸残基上可以被快速磷酸化。Zap-70 在 Tyr493 与 Syk 在 Tyr526 的活化循环磷酸化可引起两种激酶被完全激活 (4)。其他酪氨酸残基在激酶结构域之间的 B 区域（包括 Zap-70 在 Tyr315 和 Zap-70 在 Tyr 319）内的后续磷酸化，为下游信号转导分子建立了锚定位点。在 SH2 结合基序内，在多个保守的酪氨酸残基位置，Zap-70 与 Syk 可以磷酸化跨膜接头蛋白 LAT，从而为下游信号转导靶标暴露这些基序用作锚定位点 (5,6)。LAT 在 Tyr171 与 Tyr220 位点磷酸化，可以促成 Grb2、Gads/SLP-76、PLCγ1 和 PI3 激酶结合。接头蛋白 SLP-76 在 Tyr113 和 Tyr128 位点磷酸化，可以促成 Grb2 样接头分子 Gads 的结合。SLP-76 在 Ser376 位点被造血祖细胞激酶 1 (HPK1) 磷酸化，可诱导与 14-3-3ε 产生交互作用并下调 TCR 信号转导 (7,8)。磷酸肌醇特异的磷脂酶 PLCγ1 酶活性还受到 Zap70 和 Syk 在 Tyr783、Tyr711 与 Tyr1253 位点磷酸化的刺激，导致 PI-4,5-P2 强力水解 (9)。

有限使用

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。

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T Cell Signaling Antibody Sampler Kit #14541