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59414
CD206/MRC1 (E6T5J) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate)
抗体偶联物
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R
重组

CD206/MRC1 (E6T5J) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate) #59414

引用 (2)
筛选器：
  1. IF
对使用 CD206/MRC1 (E6T5J) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate)（左图，红色）标记和使用 Ras (E4K9L) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #37182（右图，伪彩绿色）和 DAPI #4083（右图，蓝色）共同标记的固定、冷冻的小鼠结肠组织进行共聚焦免疫荧光分析。
对使用 CD206/MRC1 (E6T5J) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate)（左图，红色）标记和使用 Ras (E4K9L) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #37182（右图，伪彩绿色）和 DAPI #4083（右图，蓝色）共同标记的固定、冷冻的小鼠胰腺组织进行共聚焦免疫荧光分析。
对使用 CD206/MRC1 (E6T5J) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate)（左图，红色）标记和使用 Ras (E4K9L) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #37182（右图，伪彩绿色）和 DAPI #4083（右图，蓝色）共同标记的固定、冷冻的小鼠肝脏组织进行共聚焦免疫荧光分析。
使用 CD206/MRC1 (E6T5J) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor®594 Conjugate)（红色）和 DAPI #4083（蓝色）对 MUTZ-3 细胞（左图，阳性）或 Jurkat 细胞（右图，阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。
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59414S		 100 µl （50 次检测）

Bulk & Custom Formulation

支持性数据

反应性 H M R
灵敏度 内源性
MW (kDa)
来源/同种型 兔 IgG

应用关键词：

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词：

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • GP-豚鼠
  • Rab-Rabbit
  • All-预期所有物种

产品说明

这种 Cell Signaling Technology (CST) 抗体在最佳条件下偶联于 Alexa Fluor® 594 荧光染料，并就小鼠组织的直接免疫荧光分析接受i内部测试。预计该抗体展示的物种交叉反应性与非偶联的 CD206/MRC1 (E6T5J) XP® Rabbit mAb #24595 相同。

产品使用信息

应用 稀释度
免疫荧光法（冰冻） 1:50 - 1:200
免疫荧光法（免疫细胞化学） 1:400 - 1:1600

保存

保存在 PBS (pH 为7.2)、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。4°C 保存。切勿分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

实验步骤

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免疫荧光法（冰冻）

A. 溶液与试剂

注：使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS)： (9808) 要制备 1L 1X PBS：添加 50 ml 20X PBS 至 950 ml dH2O 中并混合。调节 pH 至 8.0。
  2. 甲醛：16%，无甲醇，Polysciences 公司生产。（cat# 18814），使用新鲜制剂，小瓶打开后在 4°C 避光保存，同时在 1X PBS 中稀释使用。
  3. 封闭液 (1X PBS / 5% normal goat serum (#5425) / 0.3% Triton™ X-100)：要配制 10 ml：添加 0.5 ml normal goat serum 和 0.5 ml 20X PBS 到 9.0 ml dH2O 中，混匀。搅拌时加入 30 µl Triton™ X-100。
  4. 抗体稀释缓冲液： (1X PBS / 1% BSA / 0.3% Triton™ X-100)：要制备 10 ml，添加 30 µl Triton™ X-100 至 10 ml 1X PBS 中。充分混合后，添加 0.1 g BSA (#9998)，并混合。
  5. Prolong® Gold AntiFade Reagent (#9071)，Prolong® Gold AntiFade Reagent with DAPI (#8961)。

B. 样品制备 - 冰冻/恒冷箱切片 (IF-F)

  1. 冰冻固定组织进行免疫染色（C 部分）。
  2. 对新鲜未固定的冰冻组织，请立刻按下列步骤固定：

    1. 切片用 1X PBS 中稀释的 4% 甲醛浸没。

      注意：甲醛有毒性，仅可在通风橱中使用。

    2. 室温下固定切片 15 分钟。
    3. 吸干液体后用 1X PBS 冲洗三次，每次 5 分钟。
    4. 继续进行免疫染色操作（C 部分）。

C. 免疫染色

注意：所有随后的孵育都应当在室温下完成，除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育，以防止干燥和荧光物质淬灭。

  1. 在封闭缓冲液中封闭标本 60 分钟。
  2. 封闭标本时，按照产品网页实验步骤中推荐的稀释比例，在抗体稀释缓冲液中配制一抗。
  3. 吸去封闭缓冲液，加入稀释后的一抗。
  4. 4°C 孵育过夜。
  5. 用 1X PBS 漂洗三次，每次 5 分钟。
  6. 使用 Prolong® Gold Antifade Reagent (#9071) 或 Prolong® Gold Antifade Reagent with DAPI (#8961) ，用盖玻片盖住切片。
  7. 要达到最佳效果，使用封片液室温过夜。将切片平放避光 4°C 环境下，可长期保存。

发布​时间 2006 年 11 月

修订时间 2013 年 11 月

实验步骤编号：222

免疫荧光法（免疫细胞化学）

A. 溶液与试剂

注意：用反渗透去离子 (RODI) 水或等效净化水制备溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS)： (9808) 要制备 1L 1X PBS：添加 50 ml 20X PBS 至 950 ml dH2O 中并混合。调节 pH 至 8.0。
  2. 甲醇，100%
  3. 封闭液 (1X PBS / 5% normal goat serum (#5425) / 0.3% Triton™ X-100)：要配制 10 ml：添加 0.5 ml normal goat serum 和 0.5 ml 20X PBS 到 9.0 ml dH2O 中，混匀。搅拌时加入 30 µl Triton™ X-100。
  4. 抗体稀释缓冲液 (1X PBS / 1% BSA / 0.3% Triton X-100)：要制备 10 ml，添加 30 µl Triton™ X-100 至 10 ml 1X PBS 中。充分混合后，添加 0.1 g BSA (9998)，并混合。
  5. Prolong® Gold AntiFade Reagent (#9071)，Prolong® Gold AntiFade Reagent with DAPI (#8961)。

B. 标本制备 - 培养细胞系 (IF-IC)

注意：细胞应当在多孔板、腔室玻片或盖玻片上直接培养、处理、固定和染色。

  1. 吸干液体，随后在细胞上覆盖一层 2–3 mm 冰冷的 100% 甲醇。
  2. 在 -20°C 温度下，可让细胞固定15分钟。
  3. 吸去固定液，用 1X PBS 漂洗三次，每次 5 分钟。
  4. 继续进行免疫染色操作（C 部分）。

C. 免疫染色

注意：所有随后的孵育都应当在室温下完成，除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育，以防止干燥和荧光物质淬灭。

  1. 在封闭缓冲液中封闭标本 60 分钟。
  2. 封闭时，按产品网页中列出的抗体稀释缓冲液中稀释来制备一抗。
  3. 吸去封闭缓冲液，加入稀释后的一抗。
  4. 4°C 温度下孵育过夜。
  5. 用 1X PBS 漂洗三次，每次 5 分钟。
  6. 使用 Prolong® Gold Antifade Reagent (#9071) 以及带 DAPI (#8961) 的 Prolong® Gold AntiFade Reagent 盖住切片。
  7. 为达到最佳效果，应立即采用适当的激发波长检测标本。将切片平放避光 4°C 环境下，可长期保存。

发布​时间 2010 年 12 月

实验步骤编号：221

特异性/灵敏度

CD206/MRC1 (E6T5J) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate) 识别内源水平的 CD206/MRC1 总蛋白。该抗体可检测小鼠 CD206/MRC1 蛋白，还会与人 CD206/MRC1 发生反应，但这种抗体不建议用于对人组织进行免疫组织化学分析。相反，建议使用 CD206/MRC1 (E2L9N) Rabbit mAb #91992 对人组织样本进行免疫组织化学分析。

物种反应性：

人, 小鼠, 大鼠

来源/纯化

使用与小鼠 CD206/MRC1 蛋白中羧基末端周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

甘露糖受体（MR/CLEC13D/CD206/MMR/MRC1/巨噬细胞甘露糖受体 1）是一种在树突细胞、巨噬细胞和无血管内皮中表达的吞饮受体 (1)。甘露糖受体是一种高度糖基化的 I 型跨膜蛋白，具有三种类型的胞外结构域和一个较短且无明显信号转导基序的羧基末端胞质结构域 (2-4)。该蛋白的胞外部分由一个结合磺酰基糖链的 CR 结构域、一个结合胶原蛋白的 FNII 结构域以及八个结合糖类（包含甘露糖、岩藻糖和 GlcNAc）的 C 型凝集素结构域组成 (4-7)。受体在质膜和早期内体之间循环 (8)。其功能包括对抗原交叉呈递、内原性蛋白的清除、通过淋巴管进行的病原检测和转运过程中的作用 (9-12)。

有限使用

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