反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
流式细胞术(固定/通透) | 1:50 |
流式细胞术(活性) | 1:50 |
本实验步骤中所需的所有试剂可与我们的 Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593 一起高效购买,或使用下文所列的货号单独购买。
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
注:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。
注:固定前,贴壁细胞或组织应予以解离并处于单细胞悬液中。
注:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。
注:如果使用全血,则在固定前裂解红细胞并通过离心来洗涤。
注:如果表位被甲醛和/或甲醇破坏,可以在固定前添加靶向 CD 标记物或其他胞外蛋白质的抗体。在固定和透化过程期间,这类抗体将保持与目的靶标结合。但注意,某些荧光团(包括 PE 和 APC)会被甲醇损坏,因此不应在透化前添加。如果您不确定,请进行小规模实验。
注:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
发布时间 2009 年 7 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:407
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
注:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。
注:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
注:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。
注:人 Fc 受体与兔 IgG 发生交叉反应。当感兴趣的细胞表达高水平的 Fc 受体蛋白(例如,巨噬细胞/单核细胞谱系)时,在用兔抗体进行免疫染色之前,用人 Fc 块预孵育活细胞。
注:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。
发布时间 2017 年 6 月
修订时间 2022 年 1 月
实验步骤编号:1504
人
使用与人 MUC1 蛋白氨基末端附近残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
Mucin 是糖蛋白家族的一员,以重复结构域和密集的 O 糖基化为特征 (1)。MUC1(或 mucin 1)在多数人类癌中会异常过表达。MUC1 在癌中的表达提高会减少细胞之间和细胞-ECM 之间的相互作用。MUC1 可进行蛋白质水解裂解,并且较大的胞外域与较小的 25 kDa 羧基末端结构域有关,后者包含一个跨膜片段和一个含 72 个残基的胞质尾区 (1)。MUC1 与 ErbB 家族受体会发生相互作用,并可增强 ERK1/2 活性 (2)。MUC1 还可以与 β-链蛋白发生相互作用,并可通过 GSK-3β、PKCγ 和 Src 在 MUC1 胞质尾区的 Ser44、Thr41 和 Tyr46 位点的磷酸化作用进行调节 (3-5)。MUC1 的过表达能够加强转化 (6),并且通过 Akt 和 p53 通路减弱压力诱导的凋亡 (7,8)。
探索与本品相关的通路。
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