产品信息
1. 使用前，稍微涡旋 Protease Inhibitor Cocktail (100X)。
2. 在进行细胞裂解之前，在所需裂解缓冲液中按 1:100 的比例稀释混合物，以获得 1X 的使用浓度。
Protease Inhibitor Cocktail (100X) 是一种由 AEBSF、抑肽酶、苯丁抑制素、E64、亮抑酶肽和抑胃酶肽 A 组成的专有混合物，可广泛避免被内源性蛋白酶降解。该混合物不含 EDTA（一种金属蛋白酶抑制剂），它与一些下游应用不相容（即蛋白芯片、2D 电泳等）。如果 EDTA 为所需的蛋白酶抑制剂，则可按 5 mM 的最终使用浓度添加到细胞裂解缓冲液中。
在裂解缓冲液中稀释以获得 1X 的最终浓度时，Protease Inhibitor Cocktail 会防止总细胞提取物中的内源性蛋白酶降解蛋白。100X 蛋白酶抑制剂混合物为无色澄清液体。
1X Protease Inhibitor Cocktail：
1mM AEBSF
800nM 抑肽酶
50μM 苯丁抑制素
15μM E-64
20μM 亮肽素
10μM 胃酶抑素 A
为了研究特定目标靶蛋白，在产生蛋白裂解物期间应避免蛋白酶介导的降解。在细胞裂解期间会发生正常细胞对照丢失，因此细胞提取物中的内源性蛋白酶会以不受控的方式自由降解蛋白。蛋白酶抑制剂添加到细胞裂解缓冲液中有助于保留细胞提取物中的靶蛋白。
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