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92401
TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher
缓冲液与染料
缓冲剂

TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher #92401

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使用 AQP4 (D1F8E) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #82941(绿色)、α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #60839(红色)和 DAPI #4083(蓝色)对未经处理(下图)或经过 TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher(上图)处理的固定冷冻的小鼠肾脏进行共聚焦免疫荧光分析。
使用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)对未经处理(左图)或经过 TrueBlack® 脂褐素自发荧光淬灭剂(右图)处理且来自阿尔茨海默病淀粉样蛋白小鼠模型的固定冷冻的小鼠中脑进行共聚焦免疫荧光分析。绿色信号显示脂褐素自发荧光。
使用 Lamin A/C (4C11) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #8617(绿色)和 DAPI #4083(蓝色)对未经处理(左图)或经过 TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher处理的固定冷冻的小鼠中脑进行共聚焦免疫荧光分析。白色箭头指向自发荧光。

保存

室温保存。避光。室温保存时,本产品稳定 12 个月。

安全性信息:该产品含有二甲基甲酰胺 (DMF)。DMF 通过皮肤和肺部迅速吸收。它可能会对未出生的胎儿造成伤害。怀孕期间避免接触。如果暴露于该物质或有任何担心,请寻求医疗建议。请参阅安全数据表 (SDS)。

穿戴个人防护装备。避免接触皮肤。在阅读并理解所有安全预防措施之前,请勿操作。

实验步骤

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TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher 实验步骤

TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher 与脂褐素反应以减少自发荧光。在处理含有脂褐质的组织(脑、肾脏、肝脏、心脏、视网膜)时,请考虑使用这款试剂。

重要事项

  • TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher 已经随许多常用复染剂(如 DAPI)一起验证过。我们建议在全面实验之前测试与您预期试剂的兼容性。
  • TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher 不兼容于有机基封片剂。

所需材料

提供
  1. TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher (#92401): 以 DMF 中 20X 浓缩液供应。
不提供
  1. 70% 乙醇
  2. 1X 洗涤缓冲液(磷酸盐缓冲生理盐水):若要配制 1L,请将 100 mL 10X 洗涤缓冲液即磷酸盐缓冲生理盐水 (#12528) 添加到 900 mL 反向渗透去离子 (RODI) 水或同等级别的水。切勿向这种缓冲液添加去垢剂。

使用 TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher 预处理

  1. 将 TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher 与免疫染色实验配对时,请务必参考每种抗体的使用说明。为了效果最佳,我们建议在任何封闭步骤之前处理组织,并在染色前施加 TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence。
  2. 必要时使用与您选择的主要试剂兼容的缓冲液透化切片。我们推荐温和去垢剂,例如在 1X 洗涤缓冲液中稀释至 0.3% 的 Triton X-100。

  3. 重要提示:TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher 不兼容于去垢剂。任何涉及去垢剂的步骤必须在施加 TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher 之前完成。

  4. 在 1X 洗涤缓冲液中润洗 3 次,每次 5 分钟,以去除去垢剂。
  5. 通过在 70% 乙醇中 1:20 稀释来配制 TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher 溶液。涡旋混合。

  6. :猝灭溶液应在使用前新鲜配制,如果析出物可见则应丢弃。我们建议在稀释前将 DMF 中 TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher 20X 原液的小瓶加热至 70°C,以避免析出物形成。

  7. 立即用 100 µL - 200 µL 猝灭溶液在室温覆盖组织切片 30 秒。

  8. 重要提示:请勿使切片干透。切片可以耐受更长的孵育(长达 3 分钟),只要它们保持水化即可。

  9. 在转移到 1X 洗涤缓冲液前,在吸收性纸巾上轻敲切片以收集多余的 TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher。
  10. 在 1X 洗涤缓冲液中润洗 3 次,每次 5 分钟。
  11. 继续染色实验步骤。

实验步骤编号:2567

产品说明

TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher 专门配制用于减少来自脂褐素的自发荧光,脂褐素是一种可在老化的人体组织和动物组织中积累的物质。该产品还可以降低总体背景荧光,以及来自其他来源(如胶原蛋白、弹性蛋白和红细胞)的自发荧光。

特异性/灵敏度

除了显著减少自发荧光外,TrueBlack® Lipofuscin Autofluorescence Quencher 还可能会导致某些抗体的免疫荧光法信号降低。我们发现这种降低并未显著到影响数据解读。

有限使用

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
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