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11884
Resazurin Cell Viability Kit
细胞检测试剂盒
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Resazurin Cell Viability Kit #11884

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图 1. HeLa 细胞按不同密度接种在 96 孔板上，并孵育过夜。将Resazurin 溶液（10% 细胞培养物容量）加到平板上，并在 0、1、2、4 和 6 小时点测量相对荧光单位。
图 2. Jurkat 细胞按 1x105个细胞/孔接种在 96 孔板上，随后用不同浓度的阿司咪唑或特非那定处理过夜。依次使用 Resazurin Cell Viability Kit（左图）和 BrdU Cell Proliferation Assay Kit #6813（右图）检测细胞毒性。
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储存于 -20°C 的温度下。注：刃天青溶液应在 -20°C 避光条件下长期储存。它能在 4°C 避光保存最多 24 个月。

实验步骤

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Resazurin Cell Viability Kit 实验步骤

  1. 解冻刃天青溶液（如果冷冻保存），并将其加热至 37°C，以确保所有组分完全溶解在溶液中。
  2. 将细胞放在 96 孔板（底部透明的黑色培养板）上。一般的接种细胞数为 0.02–2 x 105 个细胞/孔，具体取决于细胞生长率。为了测定最佳细胞接种密度，建议进行细胞数滴定。
  3. 使用目标化合物孵育细胞，并持续所需时间（1–72 小时）。确保所有孔均含有等量的培养基。
  4. 添加刃天青溶液到培养板（孔中的初始容积为 10%）。例如，对于每孔含有 100 μl 培养基的培养板，每孔添加 10 μl 刃天青溶液。
  5. 在标准培养条件下孵育培养板 1–6 小时。孵育时间取决于细胞类型和细胞数量。为了确定最佳时间点，可多次读取培养板。
  6. 使用一个读板机测量相对荧光单位 (RFU)。Ex = 530–570 nm，Em = 590–620 nm。

发布​时间 2012 年 2 月 1 日

实验步骤编号：80

产品说明

Resazurin Cell Viability Kit 是一种荧光检测试剂盒，能检测细胞代谢活性。代谢活性细胞中的脱氢酶能将蓝色非荧光刃天青试剂还原成强荧光试卤灵。这种转换仅会发生在活细胞中，因此，所产生的试卤灵数量与样品中的活细胞数量成比例。使用荧光计 (Ex=530-570 nm, Em=590-620 nm) 测量相对荧光单位 (RFU) 可对检测中形成的试卤灵进行定量分析。

特异性/灵敏度

Resazurin Cell Viability Kit 可检测活细胞中代谢酶对刃天青的转换所产生的试卤灵。该试剂盒预计可用于多数细胞系。对于多数实验，0.02-2x105 个细胞/孔应该足够，但可根据细胞类型和孵育时间进行调整。为获得最佳结果，建议进行细胞数量滴定以及孵育时程控制（如图 1 所示）。
注：细菌污染物会将刃天青还原成试卤灵，从而产生假阳性结果。自发荧光化合物可能会干扰这种检测。

物种反应性：

预期的所有物种

背景

细胞活力测定广泛用于药物发现，以研究生长因子、细胞因子和细胞毒性药物。在早期药物发现，化合物筛选和之后的药物安全和毒性研究中，高通量筛选需要能够分析大量样品的可靠、灵敏和简单测定法。使用 MTT、XTT 和 WST-1 等四氮唑盐进行比色细胞活力检测的基础在于四氮唑盐在活细胞中能还原成高度着色的甲瓒化合物 (1,2)。同样，刃天青（蓝色非荧光）在活细胞中能还原成试卤灵（粉色强荧光），因此可用于评估哺乳动物细胞的毒性、活力、迁移和侵袭 (3-6)。与 XTT Cell Viability Kit #9095 类似，Resazurin Cell Viability Kit 无需放射性物质、细胞固定或细胞通透，并且这种检测中使用的细胞可用于进一步分析。

有限使用

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11884S		 1 个试剂盒（2500 次检测；96 孔样式）

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