产品信息
涡旋试管片刻，以重悬微珠。每次染色质免疫沉淀 (ChIP) 反应添加 30 μl 珠浆。对于微珠洗涤和后续的免疫复合体洗脱，使用我们的 6-Tube Magnetic Separation Rack #7017 可从溶液中分离出微珠。将含有微珠的试管放在 Magnetic Separation Rack 上，等待 1 -2 分钟让溶液变澄清，再小心地去除上清液。将试管从 Magnetic Separation Rack 上取下，添加新溶液并通过轻轻涡旋或摇晃试管来重悬微珠。
染色质免疫沉淀 (ChIP) 测定法是一种用于在细胞天然染色质背景下探测蛋白质-DNA 相互作用的强大的通用技术 (1,2)。这种测定法用于检测与基因组某个特定区域有关的多种蛋白，或相反，用于检测某种特殊蛋白结合的基因组的多个区域 (3-6)。它可用于确定各种蛋白被募集到某个基因启动子上的特定顺序，或用于“测定”整个基因位点上某种特定组蛋白修饰的相对数量 (3,4)。除了组蛋白外，ChIP 测定法还可用于分析转录因子与辅助因子、DNA 复制因子和 DNA 修复蛋白的结合。进行 ChIP 检测时，细胞或组织首先用甲醛固定，甲醛是一种可逆的蛋白-DNA 交联剂，可“维持”细胞中发生的蛋白-DNA 相互作用 (1,2)。细胞进行裂解，染色质采集后使用超声处理或酶消化法进行碎裂。染色质随后使用对某种特殊蛋白或组蛋白修饰具有特异性的抗体进行免疫沉淀。任何与目标蛋白或组蛋白修饰有关的 DNA 序列都会作为交联染色质复合体的一部分进行共沉淀，并且该 DNA 序列的相对数量会在免疫选择过程中达到富集。免疫沉淀后，蛋白质-DNA 交联被逆转，DNA 得以纯化。标准 PCR 或定量实时 PCR 用于测量通过蛋白特异性免疫沉淀达到富集的某种特定 DNA 序列的数量 (1,2)。或者，ChIP 测定法还可与基因组微芯片（芯片上的 ChIP）技术、高通测序或克隆策略联合使用，它们都能对蛋白-DNA 相互作用和组蛋白修饰进行全基因组分析 (5-8)。
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