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9956
ER Stress Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

ER Stress Antibody Sampler Kit #9956

引用 (52)
使用 Calnexin (C5C9) Rabbit mAb #2679 对来自 HepG2 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例在 1:50 和 1:250 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:50(蓝线)和 1:250(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess Simple Western 仪器上进行该实验。
使用 Calnexin (C5C9) Rabbit mAb 对 PANC1、HepG2 和 A204 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 CHOP (L63F7) Mouse mAb 对未处理的或经 Thapsigargin (300 nM,2 小时)或 Tunicamycin(24 μg/ml,2 小时)处理的 C6 和 A-204 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 BiP (C50B12) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Ero1-Lα Antibody 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 IRE1α (14C10) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 PDI (C81H6) Rabbit mAb 对不同细胞类型的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 PERK (D11A8) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹法分析。
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO*,它可在酶催化的分解期间发光。
在对照肽(左)或抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 Calnexin (C5C9) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。
使用 CHOP (L63F7) Mouse mAb(绿色)对未处理的(左)或经 Tunicamycin 处理(右)的 A-204 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。
使用 BiP (C50B12) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人恶性胶质瘤进行免疫组织化学分析。
使用 PDI (C81H6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
使用 PERK (D11A8) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。
使用 Calnexin (C5C9) Rabbit mAb(绿色)对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝已用 DY-554 phalloidin(红色)标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
使用 CHOP (L63F7) 小鼠单克隆抗体(实线)或浓度匹配的小鼠 (E5Y6Q) 单克隆抗体 IgG2a 同型对照 #61656(虚线)对未经(蓝色)或已经 tunicamycin(2 µg/mL,8 小时;绿色)处理的 HeLa 细胞进行流式细胞分析。使用 Anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 作为二抗。
使用 BiP (C50B12) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。
使用 PDI (C81H6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴癌进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对经衣霉素 (2 ug/ml) 过夜处理的 MEF 野生型细胞的交联染色质和 CHOP (L63F7) Mouse mAb #2895 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀分析。使用 SimpleChIP® Mouse ATF-3 Intron 1 Primers #13059、Mouse CHOP Promoter Primers 和 SimpleChIP® Mouse RPL30 Intron 2 Primers #7015,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
使用 BiP (C50B12) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肝癌进行免疫组织化学分析。
使用 PDI (C81H6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脾脏进行免疫组织化学分析。
在对照物肽(左)或 BiP Blocking Peptide #1084(右)存在的情况下,使用 BiP (C50B12) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
使用 PDI (C81H6) Rabbit mAb(绿色)和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色)对 NIH/3T3 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
使用与浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(红色)作为 BiP (C50B12) Rabbit mAb(蓝色)的对照,对 A204 细胞进行流式细胞术分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
To Purchase # 9956T
目录# 规格 价格 库存
9956T
1 个试剂盒(7 x 20 微升)

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
BiP (C50B12) Rabbit mAb 3177 20 µl
  • WB
  • IHC
  • F
H M 78 兔 IgG
Calnexin (C5C9) Rabbit mAb 2679 20 µl
  • WB
  • IHC
  • IF
H Mk 90 兔 IgG
Ero1-Lα Antibody 3264 20 µl
  • WB
H 60 兔 
IRE1α (14C10) Rabbit mAb 3294 20 µl
  • WB
  • IP
H M R 130 兔 IgG
PDI (C81H6) Rabbit mAb 3501 20 µl
  • WB
  • IHC
  • IF
H M R Mk 57 兔 
CHOP (L63F7) Mouse mAb 2895 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
  • F
  • ChIP
H M R 27 小鼠 IgG2a
PERK (D11A8) Rabbit mAb 5683 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
H 140 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
Rab 山羊 
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 7076 100 µl
  • WB
M 马 

产品说明

ER Stress Sampler Kit 包含研究细胞内内质网应激的试剂。试剂盒包含够量的一抗和二抗,可针对每种一抗进行 2 次蛋白质印迹实验。

特异性/灵敏度

ER Stress Antibody Sampler Kit 中的每种抗体均可检测其靶标蛋白的内源水平。

来源/纯化

使用与人 PERK 蛋白 Leu156 周围的残基、人 BiP Gly584 周围的序列、人 IRE1α His963 周围的序列、人 PDI 序列和人 CHOP 序列对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人钙联结蛋白 Ala51 周围的序列、人 Ero1-Lα Leu218 周围的序列和小鼠 MBTPS2 序列对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。通过蛋白质 A 和肽亲和色谱纯化抗体。

背景

分泌和跨膜蛋白在多核糖体上合成,然后转位到内质网 (ER) 中,在内质网中常常通过二硫键形成、氨基糖基化和折叠进行修饰。内质网包含很多分子伴侣蛋白,包括钙联结蛋白、BiP 和蛋白质二硫键异构酶 (PDI)。钙联结蛋白是一种内质网膜钙结合蛋白,可将新合成的糖蛋白保留在内质网内,确保正确折叠和质量控制 (1,2)。内质网中不规则的蛋白质折叠会增加 BiP 合成,而 BiP 会与折叠错误的蛋白质结合从而阻止其形成聚合物并帮助其重新正确折叠 (3)。
PDI 可催化二硫键的形成及异构化,而该步骤为蛋白质达到天然状态所必须的 (4)。研究发现,常驻内质网蛋白质内质氧化还原蛋白-1 (Ero1) 在酿酒酵母内质网中提供了氧化电位 (5)。Ero1-Lα 是一种与内质网膜结合的 N-糖蛋白,可以促进氧化性蛋白质折叠 (6)。内质网内稳态失衡会导致未折叠蛋白质的堆积。内质网具有一种被称为未折叠蛋白反应 (UPR) 的适应机制以应对出错的蛋白质折叠 (7)。这由蛋白所调节,比如与膜结合的转录因子蛋白酶位点2 (MBTPS2) 和丝氨酸/苏氨酸激酶 IRE1 (8-12)。PERK eIF2α 激酶是一种内质网常驻跨膜蛋白,能够将内质网应激信号与翻译抑制耦合。内质网应激会增强 PERK 活性,从而磷酸化 eIF2α 以减少蛋白质翻译。内质网应激期间,PERK 激活与其胞质激酶结构域的自磷酸化相关联 (13,14)。PERK 在 Thr980 位点的磷酸化是其激活状态的一个标记物。
内质网应激期间,CHOP 表达水平升高,CHOP 会介导程序性细胞死亡 (15)。

  1. Bergeron, J.J. et al. (1994) Trends Biochem. Sci. 19, 124-128.
  2. Williams, D.B. (2006) J. Cell Sci. 119, 615-623.
  3. Kohno, K. et al. (1993) Mol. Cell. Biol. 13, 877-890.
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  9. Cox, J.S. et al. (1993) Cell 73, 1197-1206.
  10. Mori, K. et al. (1993) Cell 74, 743-756.
  11. Lee, K. et al. (2002) Genes Dev. 16, 452-466.
  12. Shen, J. and Prywes, R. (2004) J. Biol. Chem. 279, 43046-43051.
  13. Harding, H.P. et al. (1999) Nature 397, 271-274.
  14. Shi, Y. et al. (1998) Mol. Cell. Biol. 18, 7499-7509.
  15. Zinszner, H. et al. (1998) Genes Dev 12, 982-95.

通路

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