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16029
Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit #16029

引用 (8)
使用 Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (上图) 、IRF-3 (D83B9) Rabbit mAb #4302 (中图) 、以及β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (下图) ,对未经转染 (-) 或经 Poly (I:C) (2.5 μg/ml, 6小时; +) 转染的野生型 (WT) 小鼠脂肪细胞,以及未经转染 (-) 或经 Poly (I:C) (2.5 μg/ml, 6 hr; +) 转染的 IRF-3 (-/-) 小鼠脂肪细胞进行蛋白质印迹分析。
使用 cGAS (D3O8O) Rabbit mAb 对 3T3 细胞、Neuro-2a 细胞和 C2C12 细胞的提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 TBK/NAK (D1B4) 兔单克隆抗体 #3504(上图)或 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体 #8457(下图)对未经处理 (-) 的或 TBK1/NAK 敲除型 (+) HCT116 细胞提取物进行蛋白印迹分析。
使用 IRF-3 (D83B9) Rabbit mAb, #4302(上图)或 β-actin (13E5) Rabbit mAb, #4970(下图)对对照型 HeLa 细胞(泳道 1) 或 IRF-3 敲除型 HeLa 细胞(泳道 2) 的提取物进行蛋白质印迹法分析。IRF-3 敲除型 HeLa 细胞中没有信号,这证实了该抗体对 IRF-3 的特异性。
使用 STING (D1V5L) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb(上图)或总 TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb #3504(下图)对用 TPA #4174(80 nM,过夜)分化后用 LPS (1 μg/ml) 处理长达 24 小时的 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
使用 Phospho-STING (Ser365) (D8F4W) Rabbit mAb(上图)、STING (D1V5L) Rabbit mAb (Rodent Preferred) #50494(中间)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对未转染 (-) 或转染 poly(dA:dT)(5 μg/mL,3 小时;+)的 Raw 264.7 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (上图) 或 IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb #11904 (下图) ,未经转染 (-) 或经 Poly (I:C) (2.5 μg/ml, 6小时; +) 转染的 HT-29 细胞进行蛋白质印迹分析。
使用 cGAS (D3O8O) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或转染带有 Myc/DDK 标签的全长小鼠 cGAS 蛋白 (mcGAS-Myc/DDK; +) 表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 IRF-3 (D83B9) Rabbit mAb 对转染空载或经人、小鼠或大鼠 IRF-3 构建转染的 COS-7 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。人和小鼠构建体含有表位标记。
Western blot analysis of PMA-treated THP-1 extracts from WT (left) or STING1 KO (right) using STING (D1V5L) Rabbit mAb. 用 Ponceau S 染色的膜进行总蛋白标准化(下图)。这些数据由 YCharOS Inc. 提供,该公司是一家开放科学公司,作为 CST 科学家生成的验证数据的合作伙伴,其使命是表征市售抗体。
使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb(上图)或总 TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb #3504(下图)对用 TPA #4174(80 nM,过夜)分化后用 LPS(1 μg/ml,1 小时)处理、未经处理或已经磷酸酶处理的 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (绿色) 及 EpCAM (VU1D9) Mouse mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #5488 (红色) ,对未经转染 (左图) 或经 Poly (I:C) (2.5 μg/ml, 6小时; 右图) 转染的 HT-29 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
对 C2C12 细胞提取物中的 cGAS 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 cGAS (D3O8O) Rabbit mAb。使用 cGAS (D3O8O) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法分析。
对 Raw 264.7 细胞提取物STING进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% input,泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 是 STING (D1V5L) Rabbit mAb。使用 STING (D1V5L) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法分析。
使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb(绿色)对用 TPA #4174(80nM,过夜)(左图)处理后用 LPS(1μg/ml,1 小时)(中图)处理或用 LPS 和 λ 磷酸酶处理(右图)的 THP-1 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝用 DY-554 Phalloidin(红色)标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
使用 Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb,对未经转染 (A) 或经 Poly (I:C) (2.5 µg/ml, 6小时; B) 转染的野生型小鼠脂肪细胞,及未经转染 (C) 或经 Poly (I:C) (2.5 µg/ml, 6小时; D) 转染的 IRF-3 (-/-) 小鼠脂肪细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L) ,F (ab') 2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
使用 IRF-3 (D83B9) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对用 TPA(80 nM,4 天)#9905 分化、未经处理(蓝色)或已经过 LPS(1 ug/ml,1 小时;绿色)#14011 处理的 THP-1 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
使用 Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) 兔单克隆抗体对未转染(蓝色)或转染 Poly (I:C)(2.5 μg/ml,6 小时;绿色)的 HT-29 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L) ,F (ab') 2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
使用 Phospho-IRF-3 (Ser396) (4D4G) Rabbit mAb #4947(上)或 IRF-3 (D83B9) Rabbit mAb(下)对未处理或经 LPS(1 µg/ml,1 小时)处理的分化的 THP-1 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
To Purchase # 16029T
目录# 规格 价格 库存
16029T
1 个试剂盒(7 x 20 微升)

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
STING (D1V5L) Rabbit mAb 50494 20 µl
  • WB
  • IP
H M R 33, 35 兔 IgG
Phospho-STING (Ser365) (D8F4W) Rabbit mAb 72971 20 µl
  • WB
M 41 兔 IgG
cGAS (D3O8O) Rabbit mAb 31659 20 µl
  • WB
  • IP
M 62 兔 IgG
TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb 3504 20 µl
  • WB
  • IP
H M R Mk 84 兔 IgG
Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb 5483 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
  • F
H M 84 兔 IgG
IRF-3 (D83B9) Rabbit mAb 4302 20 µl
  • WB
  • IP
H M R Mk 45-55 兔 IgG
Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb 29047 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
  • F
H M R 45-55 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
Rab 山羊 

产品说明

Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit 提供了一种经济的方法,使用磷酸化特异性和对照抗体来检测 STING 通路的关键组分的激活和表达。该试剂盒含有足量的一抗,每种一抗可进行 2 次蛋白质印迹实验。

特异性/灵敏度

Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit 中的每种抗体都能检测其靶标蛋白的内源水平。Phospho-STING (Ser365) (D8W4F) Rabbit mAb 可检测仅在 Ser365 位点被磷酸化的 STING 蛋白的内源水平。Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb 仅在 TBK1 在 Ser172 位点被磷酸化时方可检测内源水平的 TBK1。Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® 兔单克隆抗体可能会与磷酸化 IKKε 发生交叉反应。Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb 仅在 Ser396 磷酸化后可识别内源水平的 IRF-3 蛋白。

来源/纯化

使用与小鼠 cGAS 蛋白中 Ala66、人 TBK1/NAK 中 Ser645 周围的残基、人 IRF-3 和重组小鼠 STING 蛋白中羧基末端周围的残基相对应的合成肽对兔进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与小鼠 STING 蛋白中 Ser365、人 TBK1 中 Ser172 和人 IRF-3 中 Ser396 周围的残基相对应的合成肽对兔进行免疫接种来产生磷酸化特异性单克隆抗体。

背景

干扰素基因刺激蛋白 (STING, TMEM173, MITA) 是一种跨膜接头蛋白,它是细胞病原细胞浆 DNA 的天然免疫应答的一个关键组分 (1,2)。STING 是一种被发现主要在内质网中普遍表达的蛋白 (1)。在细胞浆 DNA 的刺激下,酶 cGAMP 合成酶 (cGAS) 会产生第二信使环-GMP-AMP (cGAMP) (3,4)。cGAMP 结合并激活 STING (3,4)。此外,通过 DDX41 和 IFI16 等核酸感应蛋白检测细胞浆 DNA 会导致 STING 激活 (5,6)。活化后,STING 与 TBK1 转位至核周内体,并在 Ser366(小鼠内为 Ser365)处被 ULK1 磷酸化 (7,8)。TBK1 激酶磷酸化并激活 IRF-3 和 NF-κB,从而诱导 I 型干扰素和其他免疫应答基因 (1,2,7)。

通路

探索与本品相关的通路。

有限使用

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