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41411
Phospho-Atg14 (Ser29) (D4B8M) Rabbit mAb (BSA and Azide Free)
一抗
单克隆抗体
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Phospho-Atg14 (Ser29) (D4B8M) Rabbit mAb (BSA and Azide Free) #41411

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使用 Phospho-Atg14 (Ser29) (D4B8M) Rabbit mAb（上图）、Atg14 (D1A1N) Rabbit mAb（中图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对转染空载 (-) 或转染表达带有 GFP 标签的人 Atg14 蛋白 (hAtg14-GFP; +) 或小鼠 ULK1 蛋白 (mULK1; +) 表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白印迹分析。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
使用 Phospho-Atg14 (Ser29) (D4B8M) Rabbit mAb（上图）、Atg14 (D1A1N) Rabbit mAb #96752（中间）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb（下图），对未经处理 (-) 或用 Earle's Balanced Salt Solution（EBSS，2 小时；+）和 ULK1 抑制剂 SBI-0206965 #29089（50 μM，2 小时；+）（如图所示）饥饿的 HCT 116 和 HCT 116/Atg14 shRNA 敲除型细胞的提取物进行蛋白印迹分析。HCT 116/Atg14 shRNA 敲除型细胞由明尼苏达州明尼阿波利斯明尼苏达大学的 Do-Hyung Kim 博士惠赠。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
使用 Phospho-Atg14 (Ser29) (D4B8M) Rabbit mAb（上图）、Atg14 (D1A1N) Rabbit mAb #96752（中图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对未经 (-) 或已经 λ-磷酸酶和牛小肠磷酸酶（λ-磷酸酶/CIP ；+) 处理的 HCT 116 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
使用 Phospho-Atg14 (Ser29) (D4B8M) Rabbit mAb（上图）、Atg14 (D1A1N) Rabbit mAb #96752（中间）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对未经处理 (-) 或用 Earle's Balanced Salt Solution（EBSS，2 小时）饥饿的 Saos-2 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
使用 Phospho-Atg14 (Ser29) (D4B8M) Rabbit mAb（绿色）对未经（左图，低表达）或经 Torin 1 #14379（250 nM，2 小时；中间-左图，高表达）处理的 HCT 116 Atg14 野生型细胞、经 Torin 1（中间-右图，阴性）处理的 HCT 116/Atg14 shRNA 敲除型细胞或经 λ-磷酸酶（2 小时，右图，阴性）进行后处理的 HCT 116 Atg14 野生型细胞进行共聚焦免疫荧光分析。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封片。HCT 116/Atg14 shRNA 敲除型细胞由明尼苏达州明尼阿波利斯明尼苏达大学的 Do-Hyung Kim 博士惠赠。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
使用 Phospho-Atg14 (Ser29) (D4B8M) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）经过 Torin 1 #14379（250 nM，18 小时；蓝色，低表达）处理的敲除型 HCT 116/Atg14 shRNA 细胞或经过 Torin 1（绿色，高表达）处理的野生型 HCT 116 细胞。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。HCT 116/Atg14 shRNA 敲除型细胞由明尼苏达州明尼阿波利斯明尼苏达大学的 Do-Hyung Kim 博士惠赠。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
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Bulk & Custom Formulation

支持性数据

反应性 H M R
灵敏度 内源性
MW (kDa) 65
来源/同种型 兔 IgG

应用关键词：

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词：

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • GP-豚鼠
  • Rab-Rabbit
  • All-预期所有物种

产品使用信息

本产品是产品 #92340 的无载体版本。所有数据均使用相同的克隆抗体，是包含 BSA 和甘油的常规组分产品。

该制剂非常适用于需要专门或定制抗体标记的技术，包括荧光团、金属、镧系元素和寡核苷酸。不推荐用于 ChIP、ChIP-seq、CUT&RUN 或 CUT&Tag 检测。如果您需要用于染色质分析的无载体配方，请联系我们。最佳稀释度/浓度应由最终用户确定。

BSA and Azide Free antibodies are quality control tested by size exclusion chromatography (SEC) to determine antibody integrity.

剂型

在 1X PBS（10 mM Na 2HPO4、3 mM KCl、2 mM KH2PO4 和 140 mM NaCl (pH 7.8)）中供应。不含 BSA 和叠氮化物。

本产品的标准制剂参见产品 #92340

保存

储存于 -20°C 的温度下。此产品将在 -20°C 下冷冻，因此建议分装到一次性小瓶中，以避免多次冷冻/解冻循环。 可能存在轻微沉淀，轻轻涡旋可溶解。这不会干扰抗体性能。

特异性/灵敏度

Phospho-Atg14 (Ser29) (D4B8M) Rabbit mAb (BSA and Azide Free) recognizes endogenous levels of Atg14 protein only when phosphorylated at Ser29.

物种反应性：

人, 小鼠, 大鼠

来源/纯化

使用与人 Atg14 蛋白中 Ser29 周围残基相对应的合成磷酸肽，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

自噬是自噬溶酶体降解大部分细胞浆内容物的一种分解代谢过程 (1,2)。一般在营养匮乏的条件下激活自噬，但自噬也与许多生理过程相关，包括发育、分化、神经退行性疾病、感染和癌症 (3)。已在酵母中大量发现自噬的分子机制，该机制还受大量自噬相关 (Atg) 基因的调节。这些蛋白参与自噬体的形成，自噬体是被转运到溶酶体中进行降解的胞质液泡。III 型磷酸肌醇 3-激酶 (PI3K) Vps34 可调节液泡转运和自噬 (4,5)。Vsp34 可结合许多蛋白，包括 p105/Vps15、Beclin-1, UVRAG、Atg14 和 Rubicon，从而确定 Vsp34 的功能 (6-12)。Atg14 和 Rubicon 根据其结合 Beclin-1 的能力进行鉴定，并在独特复合体中发挥抑制作用 (9-12)。位于内体和溶酶体的 Rubicon 会抑制 Vps34 脂质激酶活性；敲除 Rubicon 会增强自噬和内吞转运 (11,12)。相比之下，Atg14 位于自噬体、隔离膜和内质网，并可增强 Vps34 活性。敲除 Atg14 会抑制饥饿诱导的自噬 (11,12)。

丝氨酸/苏氨酸激酶 ULK1 在 Ser29 位点磷酸化 Atg14 可促进自噬体形成 (13)。

通路

探索与本品相关的通路。

有限使用

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