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96323
Phospho-RIP (Ser166) (D8I3A) Rabbit mAb (BSA and Azide Free)
一抗
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Phospho-RIP (Ser166) (D8I3A) Rabbit mAb (BSA and Azide Free) #96323

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使用 Phospho-RIP (Ser166) (D8I3A) Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对未经 (-) 或已经 (+) Z-VAD（20 μM，先于其他化合物 30 分钟添加）、人 TNF-α（20 ng/ml，7 小时）和 SM-164（100 nM，7 小时）处理的 HT-29 细胞进行蛋白质印迹分析。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
NCI-H1299 细胞共聚焦免疫荧光分析，未经处理（左），Z-VAD 预处理（20 毫米，30 min），然后添加 SM-164（100 Nm）和 RHTNF-α（20 ng/ml，2 HR）（中间），或使用相同的药物鸡尾酒处理，然后使用 λ 磷酸酶进行后处理（右），使用 Phospho-RIP (Ser166) (D8I3A) Rabbit Mab（绿色）。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封片。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
使用 Phospho-RIP (Ser166) (D8I3A) Rabbit mAb（实线） 或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对未经过处理（蓝色）或经过 Z-VAD（20uM，30 分钟）预处理然后再添加 Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902 和 SM-164（20 ng/mL 和 100nM，2 小时； 绿色） 的 NCI-H1299 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
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96323SF		 100 µg

Bulk & Custom Formulation

支持性数据

反应性 H M
灵敏度 内源性
MW (kDa) 78-82
来源/同种型 兔 IgG

应用关键词：

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词：

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • GP-豚鼠
  • Rab-Rabbit
  • All-预期所有物种

产品使用信息

本产品是产品 #44590 的无载体版本。所有数据均使用相同的克隆抗体，是包含 BSA 和甘油的常规组分产品。

该制剂非常适用于需要专门或定制抗体标记的技术，包括荧光团、金属、镧系元素和寡核苷酸。不推荐用于 ChIP、ChIP-seq、CUT&RUN 或 CUT&Tag 检测。如果您需要用于染色质分析的无载体配方，请联系我们。最佳稀释度/浓度应由最终用户确定。

BSA and Azide Free antibodies are quality control tested by size exclusion chromatography (SEC) to determine antibody integrity.

剂型

在 1X PBS（10 mM Na 2HPO4、3 mM KCl、2 mM KH2PO4 和 140 mM NaCl (pH 7.8)）中供应。不含 BSA 和叠氮化物。

本产品的标准制剂参见产品 #44590

保存

储存于 -20°C 的温度下。此产品将在 -20°C 下冷冻，因此建议分装到一次性小瓶中，以避免多次冷冻/解冻循环。 可能存在轻微沉淀，轻轻涡旋可溶解。这不会干扰抗体性能。

特异性/灵敏度

Phospho-RIP (Ser166) (D8I3A) Rabbit mAb (BSA and Azide Free) 仅可识别 Ser166 位点被磷酸化的 RIP 蛋白的内源水平。该抗体最好用于免疫荧光法，而 Phospho-RIP (Ser166) (D1L3S) Rabbit mAb #65746 则最好用于蛋白质印迹法。在某些细胞类型中观察到中心粒背景染色较浅。

物种反应性：

人, 小鼠

来源/纯化

使用与人 RIP 蛋白中 Ser166 周围残基相对应的合成磷酸肽，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

丝氨酸-苏氨酸激酶的受体互作蛋白 (RIP) 家族（RIP、RIP2、RIP3 和 RIP4）是重要的细胞应激调节分子，可通过 NF-κB 激活和促凋亡通路诱导促活和炎症反应 (1)。除激酶结构域外，RIP 还包含一个负责与死亡结构域受体 Fas 相互作用并通过与 TRADD 相互作用募集到 TNF-R1 的死亡结构域 (2,3)。RIP 缺失的细胞无法激活 TNF 介导的 NF-κB，从而使细胞对凋亡更为敏感 (4,5)。RIP 还与 TNF 受体相关因子 (TRAF) 相互作用，并且可通过与 NEMO 相互作用募集 IKK 到 TNF-R1 信号转导复合体，从而导致 IκB 磷酸化和降解 (6,7)。RIP 过表达会诱导 NF-κB 激活和凋亡 (2,3)。RIP 死亡结构域的 caspase-8 依赖性剪切会诱导 RIP 的凋亡活性 (8)。
坏死性凋亡，一个坏死性细胞死亡的调节通路，由多个炎症信号触发，包括肿瘤坏死因子 (TNF) 家族中的细胞因子、toll 样受体 (TLR) 等病原体传感物和缺血性损伤 (9,10)。这个过程由 caspase 负调控，并由含有 RIP 和 RIP3 激酶的复合体（通常称为坏死体）启动。RIP 的小分子抑制因子 necrostatin-1 (Nec-1) 会抑制坏死性凋亡 (11)。研究表明，坏死性凋亡会导致许多病理情况，并且 Nec-1 经证明可在缺血性脑损伤等模型中提供神经保护 (12)。RIP 在激酶结构域中对 Nec-1 敏感的多个位点被磷酸化，这些位点包括 Ser14、Ser15、Ser161 和 Ser166 (13)。

通路

探索与本品相关的通路。

有限使用

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