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9914
Phospho-Stat Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合
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Phospho-Stat Antibody Sampler Kit #9914

引用 (18)
使用 Phospho-Stat5 (Tyr694) (D47E7) XP® Rabbit mAb #4322 对经过 hIL-2（10 ng/mL，O/N）处理的血清饥饿 NK-92 细胞的裂解物 (1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb #9145（上图）、Stat3 (D3Z2G) Rabbit mAb #12640（中图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对未经处理或已经过 IFNa（#36000，100 ng/mL，5 分钟）或 IFNg（#80385，100 ng/mL，30 分钟）处理的 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb #9145 对经过 IFN-α（100 ng/mL，5 分钟）处理的血清饥饿 HeLa 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的单一靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
使用 Phospho-Stat5 (Tyr694) (D47E7) XP® Rabbit mAb，对未经处理或经红细胞生成素处理（EPO；3 单位/ml，5 分钟）的 UT-7 细胞、未经处理或经 Human Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor #8922 处理（hGM-CSF；100 ng/ml，10 分钟）的 TF-1 细胞、未经处理或经 Human Interleukin-2 #8907 处理（hIL-2；100 ng/ml，10 分钟）的 NK-92 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Stat2 Antibody（上图）或 Phospho-Stat2 (Tyr690) Antibody（下图），对未经处理或已经 IFN-α（100 ng/ml，15 分钟）处理的 Hela 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
使用 Phospho-Stat1 (Tyr701) (D4A7) Rabbit mAb（上图）或 Stat1 Antibody #9172（下图），对未经处理或已经 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927（10 ng/ml，30 分钟）处理的 HeLa、A20 和 PC-12 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Phospho-Stat3 (Ser727) Antibody（上图）和 Stat3 (79D7) Rabbit mAb #4904（下图），对未经处理或已经紫外线（100 mJ，30 分钟；+）处理、未经处理或已经 λ 磷酸酶 (+) 处理的 A172 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb，对 IFN-α 处理的 Jurkat 细胞、Hela 细胞（左）、经 EGF 处理的 A431 细胞（右）提取物进行蛋白质印迹分析。注意，抗体可检测 A431 的基础磷酸化 Stat3。
使用 Phospho-Stat6 (Tyr641) Antibody（上图）或 Stat6 antibody（下图），对已经 IL-4 (100 ng/ml) 处理规定时间的 Daudi 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Phospho-Stat5 (Tyr694) XP® (D47E7) Rabbit mAb （绿色）和 Pan-Keratin (C11) Mouse mAb #4545（红色），对经 EGF 处理（左）或未经处理（右）的 A-431 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。
使用 Phospho-Stat1 (Tyr701) (D4A7) Rabbit mAb（绿色）和 β-Tubulin (9F3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #2116（红色），对未经处理（左图）或已经 hIFN-α1 #8927（100 ng/mL，30 分钟；右图）处理的 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。
对经人 IFN-α（50 ng/ml，15 分钟）处理的 U266 提取物中的磷酸化 Stat3 (Tyr705) 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb。使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (3E2) Mouse mAb #9138 进行蛋白质印迹法分析。Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody #7076 用作二抗。
使用 Phospho-Stat6 (Tyr641) Antibody（绿色）对血清饥饿（左图）或已经 IL-4 处理（右图）的 ACHN 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
使用 Phospho-Stat5 (Tyr694) (D47E7) XP® Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对未经处理（蓝色，低）或已经过 hGM-CSF #8922（50ng/ml，15 分钟；绿色）处理的 TF-1 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
使用 Phospho-Stat1 (Tyr701) (D4A7) Rabbit mAb 对未经处理（蓝色）或已经 hIFN-α1 #8927（绿色）处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。
在 Leica® BOND™ Rx 上使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对已经 IFN-γ（50 ng/ml，30 分钟）处理的 HT-1080 细胞中提取的交联染色质，在加入 Phospho-Stat1 (Tyr701) (D4A7) Rabbit mAb 后，进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 IRF-1 内结合，IRF-1 是磷酸 Stat1 的一种已知靶标基因（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。欲知其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对饥饿过夜且已经 IL-6（100 ng/ml，30 分钟）处理的 Hep G2 细胞中提取的交联染色质，在加入 Phospho-Stat3 (Ser727) Antibody 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 human IRF-1 promoter primers、SimpleChIP® Human c-Fos Promoter Primers #4663 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
在 Leica® BOND™ Rx 上使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺神经内分泌癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 ，对已经 IFN-γ（50 ng/ml，30 分钟）处理的 4 x 106 个 HT-1080 细胞中提取的交联染色质，在加入 5 μl Phospho-Stat1 (Tyr701) (D4A7) Rabbit mAb 后，进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 5（上图）内的结合，包括 Phospho-Stat1 的已知靶标基因 IRF1（下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
使用 Phosho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 Apc (min/+) 小鼠肠道进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对已经 IFN-γ（50 ng/ml，30 分钟）处理的 HT-1080 细胞中提取的交联染色质，在加入 Phospho-Stat1 (Tyr701) (D4A7) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 human IRF-1 promoter primers、SimpleChIP® Human TAP1 Promoter Primers #5148 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析，显示出胞核定位。
使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb，对未经处理（左）或经 λ 磷酸酶处理（右）的石蜡包埋的人乳腺癌（尤其是内皮细胞）进行免疫组织化学分析。
使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 在 SignalSlide® HeLa -/+ IFNa IHC Controls #55861 上（对未经处理（左图）或经 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927 处理（右图）的石蜡包埋的 Hela 细胞沉淀物）进行免疫组织化学分析。
对 IFN-α 处理（左）或未经处理（右）Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析，用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb（绿色）标记。
使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对未经处理（蓝色）或已经过 IFNα（50 ng/ml，15 分钟；绿色）处理的 U266 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对饥饿过夜后，用 IL-6（100 ng/ml；30 分钟）处理的 Hep G2 细胞中提取的交联染色质，在加入 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 后，进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 IRF1 内结合，IRF1 是 Phospho-Sata3 的一种已知靶标基因（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。欲知其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。
使用 SimpleChIP® Plus Sonication Chromatin IP Kit #56383，对饥饿过夜后，用 IL-6（100 ng/ml）处理30 分钟）的 Hep G2 细胞中提取的交联染色质，在加入 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀分析。使用 SimpleChIP® Human c-Fos Promoter Primers #4663、human IRF1 promoter primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行量化。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对饥饿过夜后，用 IL-6（100 ng/ml；30 分钟）处理的 Hep G2 细胞中提取的交联染色质，在加入 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 human IRF-1 promoter primers、SimpleChIP® Human c-Fos Promoter Primers #4663 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
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To Purchase # 9914T
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9914T		 1 个试剂盒（6 x 20 微升）

Bulk & Custom Formulation

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Phospho-Stat1 (Tyr701) (D4A7) Rabbit mAb 7649 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
  • F
  • ChIP
 H M R 84, 91 兔 IgG
Phospho-Stat2 (Tyr690) Antibody 4441 20 µl
  • WB
 H 113 兔 
Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 9145 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
  • F
  • ChIP
 H M R Mk 79, 86 兔 IgG
Phospho-Stat3 (Ser727) Antibody 9134 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
 H M R 86 兔 
Phospho-Stat5 (Tyr694) (D47E7) XP® Rabbit mAb 4322 20 µl
  • WB
  • IF
  • F
 H M 90 兔 IgG
Phospho-Stat6 (Tyr641) Antibody 9361 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
 H 110 兔 
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
 Rab 山羊 

产品说明

Phospho-Stat Pathway Sampler Kit 是一种经济合算的方式，可用来评估 Stat 分子的激活状态，包括 Stat1 Tyr701、Stat2 Tyr690、Stat3 Tyr705/Ser727、Stat5 Tyr694 和 Stat6 Tyr641 磷酸化。该试剂盒包含的一抗和二抗足以进行 两次 次蛋白质印迹实验。

特异性/灵敏度

试剂盒中的每种磷酸-Stat 抗体仅可识别其特定靶标的磷酸化形式。

来源/纯化

使用与人 Stat2 中 Tyr690、小鼠 Stat3 中 Ser727 或人 Stat6 中 Tyr641 周围残基相对应的合成磷酸肽，对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。通过蛋白质 A 和肽亲和色谱纯化抗体。使用与人 Stat1 蛋白中 Tyr701、小鼠 Stat3 中 Tyr705 周围残基或人 Stat5a 蛋白中 Tyr694 周围残基相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

Janus kinases (Jaks) and signal transducers and activators of transcription (Stats) are utilized by receptors for a wide variety of ligands including cytokines, hormones, growth factors, and neurotransmitters. 在配体诱导的受体聚集后，自磷酸化激活 Jaks 会磷酸化相关受体、Stat 分子和其他下游信号转导蛋白的酪氨酸残基 (1,2)。核转位之后，Stat 蛋白在保守酪氨酸残基上的磷酸化会快速激活随后 SH2 介导的二聚化。Stat 二聚体结合干扰素反应元件 (IRE) 和干扰素 γ 激活的序列 (GAS) DNA 元件，导致下游基因的转录调节 (1,2)。Stats 调控反应的显著范围和特异性在某种程度上取决于不同细胞因子受体、Jaks 和 Stats 的组织特异性表达 (2,3) 以及不同 Stat 成员与不同受体之间的组合性偶联。Serine phosphorylation in the carboxy-terminal transcriptional activation domain has been shown to regulate the function of Stat1, Stat2, Stat3, Stat4, and Stat5 (1). Phosphorylation of Stat3 at Ser727 via MAPK or mTOR pathways is required for optimal transcriptional activation in response to growth factors and cytokines including IFN-gamma and ciliary neurotrophic factor (CNTF) (4,5). Jak/Stat pathways also play important roles in oncogenesis, tumor progression, angiogenesis, cell motility, immune responses, and stem cell differentiation (6-11).

通路

探索与本品相关的通路。

有限使用

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