Name: Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit
Price: 708.00 EU
Availability: InStock

引用 (8)

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 1 — 使用 IRF-3 (D6I4C) XP ® Rabbit mAb #11904 对 HeLa 细胞的裂解物 (1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:50（蓝线）和 1:250（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 2 — 使用 IRF-3 (D6I4C) XP^® Rabbit mAb, #11904（上图）或 β-actin (13E5) Rabbit mAb, #4970（下图）对对照型 HeLa 细胞（泳道 1）或 IRF-3 敲除型 HeLa 细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白质印迹分析。IRF-3 敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了该抗体对 IRF-3 的特异性。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 3 — 使用 IKKε (D20G4) Rabbit mAb 对重组 GST-IKKε #7553 和 Ramos 细胞和 RL 细胞的裂解物进行蛋白质印迹分析。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 4 — 使用 TBK/NAK (D1B4) 兔单克隆抗体 #3504（上图）或 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体 #8457（下图）对未经处理 (-) 的或 TBK1/NAK 敲除型 (+) HCT116 细胞提取物进行蛋白印迹分析。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 5 — 使用 Rig-I (D14G6) Rabbit mAb 对未经或已经 LPS（1 ug/ml，过夜）处理的分化 THP-1 和 RAW 264.7 细胞进行蛋白质印迹分析。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 6 — 使用 MAVS Antibody 对 LNCaP 细胞系、MCF-7 细胞系和 HT29 细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 7 — 使用 Phospho-IRF-3 (Ser396) (4D4G) Rabbit mAb，对对照品经 plpC 转染 (1 小时) 的 HT29 和 THP1 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 8 — 使用 MDA-5 (D74E4) Rabbit mAb，对 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析，而 293T 细胞经转染空载 (-) 或使用人类 MDA-5 (+) 进行转染。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 9 — 使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP^® Rabbit mAb（上图）或总 TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb #3504（下图）对用 TPA #4174（80 nM，过夜）分化后用 LPS (1 μg/ml) 处理长达 24 小时的 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 10 — 一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO^®，在酶催化分解期间发光。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 11 — 使用 Phospho-IKKε (Ser172) (D1B7) Rabbit mAb (上图) 或 IKKε (D20G4) Rabbit mAb #2905(下图)，对经 TPA #4174(80nM, 过夜) 分化之后以 LPS (1 μg/ml, 指定时间) 处理的 THP-1 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 12 — 使用 IRF-3 (D6I4C) XP^® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 13 — 使用 TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 14 — 使用 MAVS Antibody 对转染空载或转染人MAVS 的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 15 — 使用 MDA-5 (D74E4) Rabbit mAb，对未处理或用脂多糖（1 μg/ml，按所示时间处理）处理的已分化 THP-1 细胞提取物，进行蛋白质印迹分析。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 16 — 使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP^® Rabbit mAb（上图）或总 TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb #3504（下图）对用 TPA #4174（80 nM，过夜）分化后用 LPS（1 μg/ml，1 小时）处理、未经处理或已经磷酸酶处理的 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 17 — 使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP^® Isotype Control #3900（泳道 2）或 IRF-3 (D6I4C) XP^® Rabbit mAb（泳道 3），对 THP-1 细胞提取物的 IRF-3进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 IRF-3 (D6I4C) XP^® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。使用 Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb #3678 和 Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody #7076 作为二抗。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 18 — 使用 Rig-I (D14G6) Rabbit mAb 对 Raw264.7 和 CHO 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 19 — 使用 MAVS Antibody（绿色）对 MCF-7 细胞进行共聚焦免疫荧光分析，从而证实与 MitoTracker^® Red CMXRos（红色）标记的线粒体存在共定位。蓝色伪彩 = DRAQ5^™ （DNA 荧光染料）。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 20 — 使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP^® Rabbit mAb（绿色）对用 TPA #4174（80nM，过夜）（左图）处理后用 LPS（1μg/ml，1 小时）（中图）处理或用 LPS 和 λ 磷酸酶处理（右图）的 THP-1 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝用 DY-554 Phalloidin（红色）标记。蓝色伪彩 = DRAQ5^® #4084（DNA 荧光染料）。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 21 — 使用 IRF-3 (D6I4C) XP^® Rabbit mAb（绿色）对未经（左）或经 Poly (I:C)（2.5 μg/ml，6 小时；右）转染的 HT-29 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5^® #4084（DNA 荧光染料）。

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit: Image 22 — 使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP^® Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP^® Isotype Control #3900（虚线）对用 TPA（80 nM，4 天）#9905 分化、未经处理（蓝色）或已经过 LPS（1 ug/ml，1 小时；绿色）#14011 处理的 THP-1 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor^® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。

图像库

更多了解我们如何获得图像

To Purchase # 8348T

目录#	规格	价格	库存
8348T	1 个试剂盒（9 x 20 微升）

产品包括
相关产品

产品包括	数量	应用	反应性	MW (kDa)	同型
MDA-5 (D74E4) Rabbit mAb 5321	20 µl	WB IP	H M	135	兔 IgG
Rig-I (D14G6) Rabbit mAb 3743	20 µl	WB IP	H M R Hm Mk	102	兔 IgG
MAVS Antibody 3993	20 µl	WB IF	H	75, 52	兔
IRF-3 (D6I4C) XP^® Rabbit mAb 11904	20 µl	WB IP IF	H Mk	50-55	兔 IgG
TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb 3504	20 µl	WB IP	H M R Mk	84	兔 IgG
Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP^® Rabbit mAb 5483	20 µl	WB IP IF F	H M	84	兔 IgG
Phospho-IRF-3 (Ser396) (4D4G) Rabbit mAb 4947	20 µl	WB	H M	45-55	兔 IgG
Phospho-IKKε (Ser172) (D1B7) Rabbit mAb 8766	20 µl	WB IP	H	80	兔 IgG
IKKε (D20G4) Rabbit mAb 2905	20 µl	WB IP	H	80	兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074	100 µl	WB	Rab		山羊

试剂盒使用信息

实验步骤

2905: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法（琼脂糖）
3504: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法（磁珠）
3743: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法（琼脂糖）
3993: 蛋白印迹实验, 免疫荧光法
4947: 蛋白印迹实验
5321: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法（琼脂糖）
5483: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法（琼脂糖）, 免疫荧光法, 流式细胞术
7074: 蛋白印迹实验
8766: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法（琼脂糖）
11904: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法（磁珠）, 免疫荧光法

产品说明

Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit 是一种经济合算的方式，可用来评估 Rig-I 通路中众多成员的激活状态和总蛋白水平，包括 Rig-I、MDA-5、MAVS、IRF-3、TBK1/NAK 和 IKKε。该试剂盒包含的一抗足以针对每种抗体进行两次蛋白质印迹实验。

特异性/灵敏度

MDA-5 (D74E4) Rabbit mAb、Rig-I (D14G6) Rabbit mAb、MAVS Antibody、IRF-3 (D6I4C) XP^® Rabbit mAb、TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb 和 IKKε (D20G4) Rabbit mAb 可检测内源水平的相应总蛋白，但不会与其他蛋白发生交叉反应。使用 MAVS Antibody 检测到的 52 和 75 kDa 条带与 Seth 等人所描述的条带有关。(2005). Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP^® Rabbit mAb 仅在 TBK1/NAK 于 Ser172 处磷酸化时才检出内源水平的该蛋白质。该抗体可能会与磷酸 IKKε 发生交叉反应。仅当 IRF-3 在 Ser396 位点被磷酸化时，Phospho-IRF-3 (Ser396) (4D4G) Rabbit mAb 才能检测出内源水平的 IRF-3 。Phospho-IKKε (Ser172) (D1B7) Rabbit mAb 仅在 Ser172 磷酸化后可识别内源水平的 IKKε 蛋白。该抗体可与磷酸 TBK1/NAK 发生交叉反应。

来源/纯化

使用与人 MAVS 蛋白的羧基末端残基相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。使用与人 MDA-5 蛋白中 Arg470、人 Rig-I 蛋白中 Lys652、人 TBK1/NAK 蛋白中 Ser645、人 IKKε 蛋白中 Val345 周围残基相对应的合成肽或重组人 IRF-3 蛋白，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 TBK1/NAK 蛋白中 Ser172、人 IRF-3 蛋白中 Ser396 或人 IKKε 蛋白中 Ser172 周围残基相对应的合成磷酸肽，对动物进行免疫接种来产生活化状态的单克隆抗体。

背景

抗病毒先天免疫依赖于病毒检测蛋白触发的平行通路的结合，而这些蛋白是 Toll 样受体 (TLR) 家族和 RNA 解旋酶，例如Rig-I（视黄酸诱导基因 I）和 MDA-5（黑色素瘤分化相关抗原 5），二者可促进 I 型干扰素 (IFN) 和抗病毒酶的转录 (1-3)。TLRs 和解旋酶蛋白包含可识别不同病毒类型分子模式的位点，其中包括 DNA、单链 RNA (ssRNA)、双链 RNA (dsRNA) 和糖蛋白。这些抗病毒蛋白是在不同细胞成分中发现的；TLRs (例如 TLR3、TLR7、TLR8 和 TLR9) 在内体膜上表达且解旋酶定位在细胞浆。Rig-I 的表达可由视黄酸、脂多糖、IFN 和病毒感染诱导 (4,5)。Rig-I 和 MDA-5 共享一个 DExD/H-box 解旋酶域，可检测病毒 dsRNA 和两个氨基末端 caspase 聚集域 (CARD)，对触发下游信号转导必不可少 (4-7)。Rig-I 可结合含有一个 5'- 三磷酸末端的 dsRNA 和病毒 ssRNA，但在 host RNA 中没有发现此结构 (8,9)。虽然 Rig-I 和 MDA-5 在结构上有相关性，但二者检测的病毒有显著区别 (10,11)。足够产生信号转导和 IFN 产物解旋酶的 CARD 域，被募聚到 MAVS/VISA/Cardif/IPS-1 线粒体蛋白的 CARD 域中，而此蛋白可诱导 NF-κB、TBK1/IKKε 和 IRF-3/IRF-7 的激活 (12-15)。

有限使用

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Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit #8348