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93130
Stat Antibody Sampler Kit II
一抗
抗体小包装组合

Stat Antibody Sampler Kit II #93130

引用 (2)
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经过 (hIFN-γ) #8901(50 ng/ml,30 分钟)处理的 HT-1080 细胞和 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 分析。使用 human AIM2 promoter primers、human FZD5 promoter primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb #14994 对 MCF-7 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 HT-1080 细胞和 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了 Stat1 的已知靶标基因 FZD5 基因内的结合(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 HT-1080 细胞和 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了在染色体 2(上图)内的结合,包括 Stat1 的已知靶标基因 FZD5 基因(下图)(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。

Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from Jurkat cells using Stat6 (D3H4) Rabbit mAb #5397. 虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。This experiment was performed under reducing conditions on the Jess™ Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 12 – 230 kDa separation module.

以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照,使用 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb(实线)对 K-562 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb #94205 对 HDLM-2 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:50(蓝线)和 1:250(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb #94205 对 HDLM-2 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:50(蓝线)和 1:250(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb #14994(上图)和 β-actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对 A549 细胞(泳道 1)或 STAT1 敲除型细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白印迹分析。STAT1 敲除型 A549 细胞中没有信号,这证实了抗体对 STAT1 的特异性。
使用 Stat4 (C46B10) Rabbit mAb,对不同细胞系以及大鼠胸腺的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Stat6 (D3H4) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
使用 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。KARPAS细胞系来源:剑桥大学的 Abraham Karpas 博士。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经过 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8927(10nM,30 分钟)处理的 U266 细胞和 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在 GAS5 基因内结合。
使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb (上图) 与 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (下图),对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Stat4 (C46B10) Rabbit mAb,对ACHN、SR 与 Caki 细胞系以及大鼠胸腺的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对转染空载 (-) 或使用针对小鼠 Stat3 (mStat3 siRNA; +) 的 siRNA 转染的 NIH/3T3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对饥饿过夜后用 IL-4(100 ng/ml;30 分钟)处理的 Ramos 细胞中提取的交联染色质,在加入 Stat6 (D3H4) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human DMD Intron 2 Primers #7710、human MS4A1 promoter primers 以及 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
对 KARPAS-299 细胞提取物中的 Stat2 进行免疫沉淀。泳道 1 为10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb。使用 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹。KARPAS细胞系来源:剑桥大学的 Abraham Karpas 博士。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经过 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8927(10nM,30 分钟)处理的 U266 细胞和 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在染色体 1(上图)内的结合,包括 GAS5 基因(下图)。
使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或转染人全长 Stat5a (+) 或 Stat5b (+) 表达载体的 PC-3 细胞进行蛋白质印迹分析。
使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (泳道 2) 或 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb (泳道 3),对MCF7 细胞提取物的 Stat1 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Stat1 (9H2) Mouse mAb #9176 进行蛋白质印迹分析。
对 NK-92 细胞提取物的 Stat4 蛋白进行免疫沉淀法分析。泳道 1 是 10% input,泳道 2 仅为珠蛋白,泳道 3 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 4 是 Stat4 (C46B10) Rabbit mAb。使用 Stat4 (C46B10) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
对来自 MCF7 细胞提取物的 Stat3 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb。使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹。构象特异性二抗用来避免与 IgG 的反应性。
使用 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb(绿色),对血清饥饿(左图)或经 IFNα 处理(#1000,30 ng/mL,分钟;右图)的 A-431 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经过 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927(10nM,30min)处理的 U266 细胞和 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 分析。使用人 SIN3A 启动子引物和人 ITM2A 上游引物通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
对 K-562 细胞提取物Stat5 进行免疫沉淀。泳道 1 为10% input,泳道 2 经 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb。使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹。
使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒(磁珠法) #9005 对经 IL-2 饥饿过夜后用 IL-12 (10 ng/ml) 处理 4 小时的 NK-92 细胞的交联染色质与 Stat4 (C46B10) 兔单克隆抗体 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 Stat4 的已知靶基因 IRF1 内结合(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。欲知其他 ChIP-seq 情况,请下载产品说明书。
使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 HeLa 细胞沉淀物(左图,阳性)和 PC-3 细胞沉淀物(右图,阴性)进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对经 IL-3 饥饿处理 6 小时后以 IL-3 诱导 45 分钟的 BaF3 细胞的交联染色质和 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb 或Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Mouse CIS Intron 1 Primers #5131、mouse SOCS-3 promoter primers 和 SimpleChIP® Mouse RPL30 Intron 2 Primers #7015,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴瘤组织进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒(磁珠法) #9005 对经 IL-2 饥饿过夜后用 IL-12 (10 ng/ml) 处理 4 小时的 NK-92 细胞的交联染色质与 Stat4 (C46B10) 兔单克隆抗体 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 5(上图)内的结合,包括 Stat4 的已知靶标基因 IRF1(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb,对石蜡包埋的人结肠癌组织进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒(磁珠法) #9005 对经人源干扰素-α (IFN-α) #9906 (10nM) 处理 30 分钟的 U266 细胞的交联染色质和 Stat2 (D9J7L) 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 Stat2 的已知靶基因 USP18 内结合(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。欲知其他 ChIP-seq 情况,请下载产品说明书。
使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb (绿色) 与 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700 (红色),对经过血清饥饿过夜(左图)处理,或经Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927 (1,000 单位/mL,30 分钟(右图) 处理的 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对经 IL-2 饥饿过夜后用 IL-12 (10 ng/ml) 处理 4 小时的 NK-92 细胞中提取的交联染色质,在加入 Stat4 (C46B10) Rabbit mAb #2653 或 Normal Rabbit IgG #2729​ 后,进行染色质免疫沉淀。使用 human IRF-1 promoter primers、human PRF1 promoter primers 以及 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb,对石蜡包埋的人非小细胞肺癌进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒(磁珠法) #9005 对经人源干扰素-α (IFN-α) #9906 (10nM) 处理 30 分钟的 U266 细胞的交联染色质和 Stat2 (D9J7L) 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 22(上图)内的结合,包括 Stat2 的已知靶标基因 USP18(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
以 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照,使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb(实线)对 ACHN 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb,对石蜡包埋的人子宫内膜腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对经 Human Interferon-α (IFN-α) #9906 (100 ng/ml) 处理 30 分钟的 U266 细胞中提取的交联染色质,在加入Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729​ 后,进行染色质免疫沉淀。使用 human USP18 promoter primers、SimpleChIP® Human WARS Intron 1 Primers #30101 以及 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb,对石蜡包埋的人前列腺癌组织进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对经 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8901(50 ng/ml,30 分钟)处理的 HT-1080 细胞的交联染色质,与 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 human IRF-1 promoter primers、SimpleChIP® Human TAP1 Promoter Primers #5148 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb(绿色)和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色),对血清饥饿(左图)或经 Human Interleukin-6 (hIL-6) #8904(100 ng/mL,20 分钟;中间)处理的 HeLa 细胞(Stat3 阳性)或经 Human Interleukin-6 (hIL-6) #8904(100 ng/mL,20 分钟;右图)处理的 PC-3 细胞(Stat3 阴性)进行共聚焦免疫荧光分析。
使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb #30835(上图)或 β-actin (13E5) Rabbit mAb #4970(下图)对 HeLa 对照细胞(泳道 1)或 Stat3 敲除型细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白质印迹分析。Stat3 敲除型细胞中没有信号,这证实了抗体对 Stat3 的特异性。
To Purchase # 93130T
目录# 规格 价格 库存
93130T
1 个试剂盒(6 x 20 微升)

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 14994 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
  • F
  • ChIP
  • C&R
H M R Mk 84, 91 兔 IgG
Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 72604 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
  • F
  • ChIP
  • C&R
H M 97, 113 兔 IgG
Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb 30835 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
H M R 79, 86 兔 IgG
Stat4 (C46B10) Rabbit mAb 2653 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
H M R 81 兔 
Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb 94205 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
H M R 90 兔 IgG
Stat6 (D3H4) Rabbit mAb 5397 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
H M R 110 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
Rab 山羊 

产品说明

Stat Antibody Sampler Kit II 是一种经济合算的方法,可用来检测整个 Stat 家族:Stat1-6。该试剂盒包含足够的一抗,每个一抗可进行两次蛋白质印迹法实验。

特异性/灵敏度

Stat Antibody Sampler Kit II 中每个抗体,可识别特异性靶标蛋白的内源水平。Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 可识别 150 kDa 的未知蛋白。在啮齿动物细胞中观察到某些 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb 染色不清晰。Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb 可识别 Stat5 的 α 和 β 同工型(Stat5α 和 Stat5β)。

来源/纯化

使用与人 Stat1 蛋白质中 Pro688、人 Stat2 蛋白质中 Leu706、人 Stat3 蛋白质中 Pro695、人 Stat4 蛋白质中 Lys151、人 Stat5 蛋白质中 Leu60 和 人 Stat6 蛋白中 Gly582 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

Janus kinases (Jaks) and signal transducers and activators of transcription (Stats) are utilized by receptors for a wide variety of ligands including cytokines, hormones, growth factors, and neurotransmitters. 在配体诱导的受体聚集后,自磷酸化激活 Jaks 会磷酸化相关受体、Stat 分子和其他下游信号转导蛋白的酪氨酸残基 (1,2)。核转位之后,Stat 蛋白在保守酪氨酸残基上的磷酸化会快速激活随后 SH2 介导的二聚化。Stat 二聚体结合干扰素反应元件 (IRE) 和干扰素 γ 激活的序列 (GAS) DNA 元件,导致下游基因的转录调节 (1,2)。Stats 调控反应的显著范围和特异性在某种程度上取决于不同细胞因子受体、Jaks 和 Stats 的组织特异性表达 (2,3) 以及不同 Stat 成员与不同受体之间的组合性偶联。Serine phosphorylation in the carboxy-terminal transcriptional activation domain has been shown to regulate the function of Stat1, Stat2, Stat3, Stat4, and Stat5 (1). Phosphorylation of Stat3 at Ser727 via MAPK or mTOR pathways is required for optimal transcriptional activation in response to growth factors and cytokines including IFN-gamma and ciliary neurotrophic factor (CNTF) (4,5). Jak/Stat pathways also play important roles in oncogenesis, tumor progression, angiogenesis, cell motility, immune responses, and stem cell differentiation (6-11).

通路

探索与本品相关的通路。

有限使用

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