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9939
Stat Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合
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Stat Antibody Sampler Kit #9939

引用 (12)

Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from Jurkat cells using Stat6 (D3H4) Rabbit mAb #5397. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。This experiment was performed under reducing conditions on the Jess™ Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 12 – 230 kDa separation module.

使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb #94205 对 HDLM-2 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:50（蓝线）和 1:250（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb #94205 对 HDLM-2 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:50（蓝线）和 1:250（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
使用 Stat3 (79D7) Rabbit mAb #4904和 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125，对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® Stat3 siRNA I (+) 或 SignalSilence® Stat3 siRNA II #6582 (+) 转染的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。Stat3 (79D7) Rabbit mAb 可确认 Stat3 表达沉默，而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用于观察上样量和 Stat3 siRNA 的特异性。
使用 Stat6 (D3H4) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
使用 Stat1 Antibody #9172（上图）和 β-actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对 A549 细胞（泳道 1）或 STAT1 敲除型细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白印迹分析。STAT1 敲除型 A549 细胞中没有信号，这证实了抗体对 STAT1 的特异性。
使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb (上图) 与 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (下图)，对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Stat3 (79D7) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对饥饿过夜后用 IL-4（100 ng/ml；30 分钟）处理的 Ramos 细胞中提取的交联染色质，在加入 Stat6 (D3H4) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human DMD Intron 2 Primers #7710、human MS4A1 promoter primers 以及 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
在转染空载、转染非靶向（对照）siRNA 或转染 Stat1 siRNA48 小时后，对 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。使用 Stat1 Antibody #9172 检测Stat1，使用 p42 MAPK Antibody #9108 检测 p42。Stat1 Antibody 可确认 Stat1 表达沉默，而 p42 MAPK Antibody 可用作蛋白上样和 siRNA 特异性对照。
使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或转染人全长 Stat5a (+) 或 Stat5b (+) 表达载体的 PC-3 细胞进行蛋白质印迹分析。
使用 Phospho-Stat1 (Tyr701) Antibody #9171（上图）或 Stat1 Antibody（下图），对未经处理的或经 IFN-α 处理 (100 ng/ml) 的 SK-MEL-28 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
对 K-562 细胞提取物Stat5 进行免疫沉淀。泳道 1 为10% input，泳道 2 经 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb。使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对经 IL-6 (100 ng/ml) 处理 30 分钟的 Hep G2 细胞中提取的交联染色质，在加入 Stat3 (79D7) Rabbit mAb 或Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 human IRF-1 promoter primers、SimpleChIP® Human c-Fos Promoter Primers #4663 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对经 IFN-γ (50 ng/ml) 处理 30 分钟后的 HT-1080 细胞中提取的交联染色质，在加入 Stat1 Antibody 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 human IRF-1 promoter primers、SimpleChIP® Human TAP1 Promoter Primers #5148 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对经 IL-3 饥饿处理 6 小时后以 IL-3 诱导 45 分钟的 BaF3 细胞的交联染色质和 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb 或Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Mouse CIS Intron 1 Primers #5131、mouse SOCS-3 promoter primers 和 SimpleChIP® Mouse RPL30 Intron 2 Primers #7015，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
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To Purchase # 9939T
目录# 规格 价格 库存
9939T		 1 个试剂盒（4 x 20 微升）

Bulk & Custom Formulation

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Stat1 Antibody 9172 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
 H M R Mk 84, 91 兔 
Stat3 (79D7) Rabbit mAb 4904 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
 H M R Mk 79, 86 兔 IgG
Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb 94205 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
 H M R 90 兔 IgG
Stat6 (D3H4) Rabbit mAb 5397 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
 H M R 110 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
 Rab 山羊 

产品说明

Stat Antibody Sampler Kit 是一种高性价比的方式，可用来检验多种 Stat 蛋白：Stat1、Stat3、Stat5 和 Stat6。试剂盒包括足量的一抗和二抗，可进行 2 次蛋白质印迹实验。

特异性/灵敏度

试剂盒中的每种 Stat 抗体仅可识别其靶标蛋白，与磷酸化状态无关。

来源/纯化

使用与人 Stat1 的序列相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。使用与人 Stat5 中 Leu60、人 Stat6 中 Gly582 周围残基相对应的合成肽以及与小鼠 Stat3 的羧基末端序列相对应的 Stat3 融合蛋白，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

Janus kinases (Jaks) and signal transducers and activators of transcription (Stats) are utilized by receptors for a wide variety of ligands including cytokines, hormones, growth factors, and neurotransmitters. 在配体诱导的受体聚集后，自磷酸化激活 Jaks 会磷酸化相关受体、Stat 分子和其他下游信号转导蛋白的酪氨酸残基 (1,2)。核转位之后，Stat 蛋白在保守酪氨酸残基上的磷酸化会快速激活随后 SH2 介导的二聚化。Stat 二聚体结合干扰素反应元件 (IRE) 和干扰素 γ 激活的序列 (GAS) DNA 元件，导致下游基因的转录调节 (1,2)。Stats 调控反应的显著范围和特异性在某种程度上取决于不同细胞因子受体、Jaks 和 Stats 的组织特异性表达 (2,3) 以及不同 Stat 成员与不同受体之间的组合性偶联。Serine phosphorylation in the carboxy-terminal transcriptional activation domain has been shown to regulate the function of Stat1, Stat2, Stat3, Stat4, and Stat5 (1). Phosphorylation of Stat3 at Ser727 via MAPK or mTOR pathways is required for optimal transcriptional activation in response to growth factors and cytokines including IFN-gamma and ciliary neurotrophic factor (CNTF) (4,5). Jak/Stat pathways also play important roles in oncogenesis, tumor progression, angiogenesis, cell motility, immune responses, and stem cell differentiation (6-11).

有限使用

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