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9765
Vesicle Trafficking Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Vesicle Trafficking Antibody Sampler Kit #9765

引用 (4)
对使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb(左图,红色)标记并使用 DyLight 488 Phalloidin #12935(右图,绿色)和 DAPI #4083(右图,蓝色)共标记的固定的冷冻小鼠脾脏组织进行共聚焦免疫荧光分析。
对使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb(左图,红色)标记并使用 DyLight 488 Phalloidin #12935(右图,绿色)和 DAPI #4083(右图,蓝色)共标记的固定的冷冻小鼠肾脏组织进行共聚焦免疫荧光分析。
对使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb(左图,红色)标记并使用 DyLight 488 Phalloidin #12935(右图,绿色)和 DAPI #4083(右图,蓝色)共标记的固定的冷冻小鼠骨骼肌组织进行共聚焦免疫荧光分析。
使用 Syntaxin 6 (C34B2) Rabbit mAb,对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Phospho-Caveolin-1 (Tyr14) Antibody (上图) 和 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb #3267 (下图) ,对未经处理的 (-) 或经 H2O2处理 (+) 的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对不同细胞类型提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 EEA1 (C45B10) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 EEA1 (C45B10) Rabbit mAb #3288(绿色)、GFAP (GA5) Mouse mAb #3670(红色)和 DAPI #4083(蓝色)对阿尔茨海默病淀粉样蛋白小鼠模型中的固定冷冻的大脑进行共聚焦免疫荧光图块扫描。
对使用 EEA1 (C45B10) Rabbit mAb #3288(左图,绿色)标记以及使用 GFAP (GA5) Mouse mAb #3670(右图,红色)和 DAPI #4083(右图,蓝色)共同标记的固定冷冻的小鼠丘脑进行共聚焦免疫荧光分析。
对使用 EEA1 (C45B10) Rabbit mAb #3288(左图,绿色)标记以及使用 GFAP (GA5) Mouse mAb #3670(右图,红色)和 DAPI #4093(右图,蓝色)共同标记的固定冷冻的小鼠海马体进行共聚焦免疫荧光分析。
使用 APPL1 (D83H4) XP® Rabbit mAb 对不同细胞类型提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。
使用 Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO*,它可在酶催化的分解期间发光。
使用 GOPC (D10A12) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Syntaxin 6 (C34B2) Rabbit mAb(绿色),对 MCF7 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。蓝色伪彩 = DRAQ5 (DNA 荧光染料)。
使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb #3267(上图)或 β-actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对对照 HeLa 细胞(泳道 1)或 Caveolin-1 敲除型 HeLa 细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白质印迹分析。Caveolin-1 敲除型 HeLa 细胞中没有信号,这证实了抗体对Caveolin-1 的特异性。
使用 EEA1 (C45B10) Rabbit mAb(绿色)对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。蓝色伪彩 = DRAQ5 (DNA 荧光染料)。
使用 APPL1 (D83H4) XP® Rabbit mAb(绿色)对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
Western blot analysis of HAP1 extracts from WT (left) or RAB5A KO (right) using Rab5A (E6N8S) Mouse mAb. 用 Ponceau S 染色的膜进行总蛋白标准化(下图)。这些数据由 YCharOS Inc. 提供,该公司是一家开放科学公司,作为 CST 科学家生成的验证数据的合作伙伴,其使命是表征市售抗体。
使用 Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP® Rabbit mAb(绿色)对 SH-SY5Y 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对 HeLa 细胞中提取的 caveolin-1 进行免疫沉淀,之后再使用相同的抗体进行蛋白质印迹分析。泳道 1 是 5% 输入对照。
对 HeLa 细胞提取物 Rab5A 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415,泳道 3 为不含 HeLa 细胞提取物的 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体,泳道 4 为 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体。使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体进行蛋白印迹分析。
使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类结肠癌进行免疫组织化学分析。
对 HeLa 细胞提取物 Rab5A 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415,泳道 3 为 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体。使用 Rab5 (C8B1) 兔单克隆抗体 #3547 进行蛋白印迹分析。
使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴瘤进行免疫组织化学分析。
使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体对石蜡包埋的人乳腺导管癌进行免疫组织化学分析。
在对照肽(左图)或抗原特异性肽(右图)存在的情况下,使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肺进行免疫组织化学分析。
使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体对石蜡包埋的人卵巢浆液性乳头状癌进行免疫组织化学分析。
使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb(绿色)对 C2C12 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。蓝色伪彩 = DRAQ5®(DNA 荧光染料)。
以浓度匹配的 Mouse (G3A1) IgG1 Isotype Control #5415(右图)作为对照,使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体(左图)对石蜡包埋的人结肠腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照,使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb(实线)对 Hela 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体对石蜡包埋的人前列腺腺癌进行免疫组织化学分析。
使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体(绿色)对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight 554 Phalloidin #13054(红色)标记。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
To Purchase # 9765T
目录# 规格 价格 库存
9765T
1 个试剂盒(8 x 20 微升)

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Phospho-Caveolin-1 (Tyr14) Antibody 3251 20 µl
  • WB
H M R Mk 23, 25 兔 
Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 3267 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
  • F
H M R Hm Mk B Dg 21, 24 兔 IgG
Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP® Rabbit mAb 4796 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
H M R Mk 190 兔 IgG
APPL1 (D83H4) XP® Rabbit mAb 3858 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
H M R Mk 82 兔 IgG
EEA1 (C45B10) Rabbit mAb 3288 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
H M R 170 兔 IgG
Syntaxin 6 (C34B2) Rabbit mAb 2869 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
H M R 32 兔 IgG
Rab5A (E6N8S) Mouse mAb 46449 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
H M R Mk 25 小鼠 IgG1
GOPC (D10A12) Rabbit mAb 8576 20 µl
  • WB
H 59 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
Rab 山羊 
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 7076 100 µl
  • WB
M 马 

产品说明

Vesicle Trafficking Antibody Sampler kit 是分析参与胞内转运货物蛋白的蛋白质的一种高性价比方式。该试剂盒包含的一抗和二抗足以进行 2 次蛋白质印迹分析。

特异性/灵敏度

仅在小窝蛋白 1 在 Tyr14 位点被磷酸化时,Phospho-Caveolin-1 (Tyr14) Antibody 才能检测出小窝蛋白 1 的内源水平,但不与小窝蛋白 2、小窝蛋白-3 或小窝蛋白 1β(小窝蛋白 1 的同工型)发生交叉反应。Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 可检测 caveolin-1 总蛋白的内源水平。Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP® Rabbit mAb 可检测内源水平的网格蛋白总蛋白。APPL1 (D83H4) XP® Rabbit mAb 可检测 APPL1 总蛋白的内源水平。EEA1 (C45B10) Rabbit mAb 可检测 EEA1 总蛋白的内源水平。Syntaxin 6 (C34B2) Rabbit mAb 可检测内源水平的总突触融合蛋白 6 。GOPC (D10A12) Rabbit mAb 可检测内源水平的总 GOPC 蛋白。Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体可检测 Rab5A 总蛋白的内源水平。

来源/纯化

使用与人小窝蛋白 1 的 Tyr14 周围的残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。使用与人小窝蛋白 1 的 Glu20、人网格蛋白重链蛋白的 Pro1663、人 APPL1 的 Thr426、人 EEA1 蛋白的 Ser70、小鼠突触融合蛋白 6 的 Tyr140、人 GOPC 蛋白的 Phe31 和人 Rab5A 蛋白的 Gly190 周围的残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

囊泡运输是一个不可或缺的细胞过程,参与的相关蛋白还在其他信号转导通路中发挥主要作用。小窝蛋白与许多生物功能有关,包括囊泡运输、胆固醇平衡、细胞黏附、凋亡,同时还与神经退行性疾病有关 (1)。小窝蛋白被认为可作为融合信号转导的支架蛋白。小窝蛋白在 Tyr14 位点的磷酸化对小窝蛋白结合包含 SH2 或 PTB 结构域的接头蛋白非常重要,如 GRB7 (2-4)。

包被网格蛋白的囊泡在内吞后和多条囊泡运输通路期间提供胞内蛋白转运。囊泡在细胞膜上的特异区域形成,并且网格蛋白与相关蛋白结合形成网格蛋白包被小凹。这些细胞膜相关的小凹内陷,内化蛋白质形成细胞内的网格蛋白包被囊泡 (5,6)。网格蛋白在这些囊泡中大量存在,并以三脚蛋白复合体的基本组装形式存在。每个网格蛋白三脚蛋白复合体由三个网格蛋白重链和三个网格蛋白轻链组成。网格蛋白重链蛋白由许多能结合其他囊泡蛋白的功能性结构域组成 (6)。

APPL1 多结构域接头蛋白是 BAR 结构域蛋白家族的一员,参与多个信号转导通路中的膜转运 (7)。

EEA1 是一种早期内体标记物,也是一种对早期内体膜融合和转运非常重要的 Rab5 效应蛋白 (8,9)。Syntaxin 6 是一个广泛表达的 SNARE 蛋白 S25C 家族成员 (10,11)。Syntaxin 6 蛋白定位于转运高尔基体和内涵体内,通过参与多种 SNARE 蛋白活动调节膜转运 (12-14)。它在氨基末端区域有两个卷曲螺旋结构域(CC1 和 CC2),在羧基末端区域有一个 PDZ 结构域 (15)。CC2 结构域及其邻近的连接物区域介导 GOPC 与高尔基蛋白 golgin-160 和 Q-SNARE 突触融合蛋白 6 的结合 (15,16)。 GOPC 的 PDZ 结构域与靶标蛋白的羧基末端相互作用以介导靶标蛋白囊泡运输和表面表达 (17-20)。

Rab5 是小 Rab GTP 酶 Ras 超家族的一员。Rab5 位于质膜和早期内体,可在早期内吞期间作为一种囊泡运输的关键调节蛋白 (21)。

  1. Smart, E.J. et al. (1999) Mol Cell Biol 19, 7289-304.
  2. Nomura, R. and Fujimoto, T. (1999) Mol Biol Cell 10, 975-86.
  3. Volonté, D. et al. (2001) J Biol Chem 276, 8094-103.
  4. Lee, H. et al. (2000) Mol Endocrinol 14, 1750-75.
  5. Rodriguez-Boulan, E. et al. (2005) Nat Rev Mol Cell Biol 6, 233-47.
  6. Mousavi, S.A. et al. (2004) Biochem J 377, 1-16.
  7. Habermann, B. (2004) EMBO Rep 5, 250-5.
  8. Mu, F.T. et al. (1995) J Biol Chem 270, 13503-11.
  9. Christoforidis, S. et al. (1999) Nature 397, 621-5.
  10. Bock, J.B. et al. (2001) Nature 409, 839-41.
  11. Bock, J.B. et al. (1996) J Biol Chem 271, 17961-5.
  12. Wendler, F. and Tooze, S. (2001) Traffic 2, 606-11.
  13. Bock, J.B. et al. (1997) Mol Biol Cell 8, 1261-71.
  14. Mallard, F. et al. (2002) J Cell Biol 156, 653-64.
  15. Charest, A. et al. (2001) J Biol Chem 276, 29456-65.
  16. Hicks, S.W. and Machamer, C.E. (2005) J Biol Chem 280, 28944-51.
  17. Cheng, J. et al. (2002) J Biol Chem 277, 3520-9.
  18. He, J. et al. (2004) J Biol Chem 279, 50190-6.
  19. Wente, W. et al. (2005) J Biol Chem 280, 32419-25.
  20. Ito, H. et al. (2006) Biochem J 397, 389-98.
  21. Zerial, M. and McBride, H. (2001) Nat Rev Mol Cell Biol 2, 107-17.

有限使用

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