| 反应性 | H |
产品信息
CST 建议转染 100 nM SignalSilence® B-Raf siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程，请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题，请随时联系 CST。
每个小瓶含有相当于 100 次转染的量，对应于每次转染时 24 孔板中 100 nM 的最终 SiRNA 浓度，每孔总量为 300 µl。
通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成，以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA，从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比，以最大程度确保批间一致性。
A-Raf, B-Raf, c-Raf (Raf-1) 是通过 GTP 结合蛋白 Ras 所募集的主要效应因子，能激活 MEK-MAP 激酶通路 (1)。对 c-Raf 的活化了解最透彻，即涉及多个激活位点（包括 Ser338、Tyr341、Thr491、Ser494、Ser497 和 Ser499）的磷酸化 (2)。p21 激活的蛋白激酶 (PAK) 已证明可在 Ser338 位点磷酸化 c-Raf，并且 Src 家族可磷酸化 Tyr341 以诱导 c-Raf 活性 (3,4)。c-Raf 蛋白的 Ser338 位点与 A-Raf 的 Ser299 和 B-Raf 的 Ser445 相对应， 不过 B-Raf 的位点是持续性磷酸化的 (5)。c-Raf 上的抑制性 14-3-3 结合位点 Ser259 和 Ser621 可以分别由 Akt 和 AMPK 来磷酸化 (6,7)。虽然 A-Raf、B-Raf、c-Raf 的序列和功能相似，但是调节方式各不相同 (8)。值得注意的是，B-Raf 蛋白包含三个与 Akt 磷酸化共有位点（Ser364、 Ser428 和 Thr439 位点），但没有与 c-Raf Tyr341 相对应的位点 (8,9)。研究表明，B-Raf 蛋白的突变体 V600E，会导致激酶活性的升高，并且这种突变普遍存在于恶性黑色素瘤中 (10)。c-Raf 蛋白的六个位点（Ser29、Ser43、Ser289、Ser296、 Ser301 和 Ser642 位点）都过度磷酸化，这与 c-Raf 蛋白的失活相一致。这六个位点的过度磷酸化依赖于下游的 MEK 信号转导， 使得 c-Raf 对后续的激活事件无反应 (11)。
探索与本品相关的通路。
STRING - 已知和预测的蛋白质间相互作用。
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