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43811
Pyroptosis Antibody Sampler Kit
一抗
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Pyroptosis Antibody Sampler Kit #43811

引用 (5)
Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from THP-1 cells treated with TPA (80nM, O/N) + LPS (1 µg/ml 15min) using IL-1β (D3U3E) Rabbit mAb #12703. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
使用 IL-1β (D3U3E) Rabbit mAb（上）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb 8457#（下）对未经处理的 (-) 或经 LPS 处理（100ng/ml，3小时；+）的 THP-1 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Cleaved Gasdermin D (Asp275) (E7H9G) Rabbit mAb（上图）、总 Gasdermin D (L60) Antibody #93709（中图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对采用 TPA #4174（50 ng/ml，过夜）分化然后经过 LPS #14011（5 μg/ml，指示时间）处理的 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Caspase-1 (D7F10) Rabbit mAb 对 THP-1 和 NK-92 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Cleaved Caspase-1 (Asp297) (D57A2) Rabbit mAb（上图）或 Caspase-1 (D7F10) Rabbit mAb #3866（下图）对未经转染 (-) 或转染过表达人 caspase-1 (+) 表达载体的 COS-7 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 Caspase-4 Antibody 对 KARPAS-299、THP-1 和 IM-9 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Caspase-5 (D3G4W) Rabbit mAb（上）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下），对先后经 TPA #4174 (80 nM, 过夜) 分化和脂多糖 #14011 (1 μg/ml, 指定时间) 处理的 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb，对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹法分析。
一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
使用 Cleaved-IL-1β (Asp116) (D3A3Z) Rabbit mAb，对重组 Human Interleukin-1β (hIL-1β) # 8900 进行蛋白质印迹分析。
使用 Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb（上图）或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 对 PC-3 细胞和 PC-3 GSDMD 敲除 (-/-) 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 IL-1β (D3U3E) Rabbit mAb 对重组 Human Interleukin-1β (hIL-1β) #8900 进行蛋白印迹分析。
对采用 TPA #4174（50 ng/ml，过夜）分化然后经过 LPS #14011（5 μg/ml，6 小时）处理的 THP-1 细胞的 Cleaved Gasdermin D (Asp725) 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入对照，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 Cleaved Gasdermin D (Asp275) (E7H9G) Rabbit mAb。使用 Cleaved Gasdermin D (Asp275) (E7H9G) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
使用 Caspase-1 (D7F10) Rabbit mAb 对未转染或经人 caspase-1 转染的 COS 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Cleaved Caspase-1 (Asp297) (D57A2) Rabbit mAb 对经 LPS 处理（1 ug/ml，8 小时）后用 TPA #9905（80 nM，过夜）分化的 THP-1 细胞培养基提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 Caspase-4 Antibody 对重组活化的 caspase-1、 -4 和 -5的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Caspase-5 (D3G4W) Rabbit mAb（上）和 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 （下） 对转染空载 (-) 或转染构建表达全长人 caspase-4 蛋白 (hCasp4; +) 或 caspase-5 蛋白 (hCasp5; +) 转染的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb，对石蜡包埋的小鼠肺进行免疫组织化学分析。
使用 HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb 对未经处理 (-) 或经 Lipopolysaccharides (LPS) #14011（50 ng/ml，4 小时；+）处理后再用 Nigericin（15 μM，45 分钟；+）处理的小鼠骨髓源性巨噬细胞 (mBMDM) 的培养基提取物进行蛋白印迹法分析。
使用 Cleaved-IL-1β (Asp116) (D3A3Z) Rabbit mAb，对收集自 THP-1 细胞的细胞或培养基的提取物进行蛋白质印迹分析，并且这些 THP-1 细胞使用 TPA #4147（80 nM，过夜）进行分化，随后使用 Lipopolysaccharides (LPS) #14011（1 μg/ml，6 小时）处理 (-) 或不用其进行处理 (+)。
使用 Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb（上）或GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174（下）对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 IL-1β (D3U3E) Rabbit mAb（绿色）对未经处理的（左）或经 LPS 处理（500 ng/ml，2 小时；右）的 THP-1 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。
使用 Cleaved Gasdermin D (Asp275) (E7H9G) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺导管癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb，对石蜡包埋的人类结肠癌进行免疫组织化学分析。
使用 Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb （上图）或GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174（下图）对采用 TPA #4174（50 ng/ml，过夜）分化然后经过 LPS #14011（5 μg/ml，指示时间）处理的 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 IL-1β (D3U3E) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对未经处理（蓝色，阴性）或已经 LPS #14011（100 ug/ml，3 分钟；绿色，阳性）处理的 THP-1 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')₂ Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
在未裂解 Gasdermin D 肽（左图）或 Asp275 位点特异性裂解的 Gasdermin D 肽（右图）存在的情况下，使用 Cleaved Gasdermin D (Asp275) (E7H9G) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb，对石蜡包埋的人类肺癌进行免疫组织化学分析。
使用 Cleaved-IL-1β (Asp116) (D3A3Z) Rabbit mAb（绿色），对使用 TPA #4174（80 nM， 24 小时）分化，并随后用 Lipopolysaccharides (LPS) #14011（1 μg/ml，6 小时）处理或不用其处理的 THP-1 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
对 THP-1 细胞提取物的 Gasdermin D 蛋白进行免疫沉淀法分析。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb。使用 Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 用作二抗。
使用 Cleaved Gasdermin D (Asp275) (E7H9G) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人鳞状细胞肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb，对石蜡包埋的人体前列腺癌进行免疫组织化学分析。
使用 Cleaved Gasdermin D (Asp275) (E7H9G) 对石蜡包埋的人非霍奇金淋巴瘤细胞进行免疫组织化学分析。
使用 Cleaved Gasdermin D (Asp275) (E7H9G) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 Cleaved Gasdermin D (Asp275) (E7H9G) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人脾脏细胞（左图，阳性）和骨骼肌细胞（右图，阴性）进行免疫组织化学分析。
使用 Cleaved Gasdermin D (Asp275) (E7H9G) Rabbit mAb 对经过 TPA #4174（左图）分化后再经过 LPS #14011（右图）处理的石蜡包埋的 THP-1 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
使用 Cleaved Gasdermin D (Asp275) (E7H9G) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
图像库
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To Purchase # 43811T
目录# 规格 价格 库存
43811T		 1 个试剂盒（9 x 20 微升）

Bulk & Custom Formulation

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Gasdermin D (E8G3F) Rabbit mAb 97558 20 µl
  • WB
  • IP
 H 53, 43, 30, 21 兔 IgG
Cleaved Gasdermin D (Asp275) (E7H9G) Rabbit mAb 36425 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
 H 30 兔 IgG
Caspase-1 (D7F10) Rabbit mAb 3866 20 µl
  • WB
  • IP
 H 48, 20 兔 IgG
Cleaved Caspase-1 (Asp297) (D57A2) Rabbit mAb 4199 20 µl
  • WB
  • IP
 H 20, 22 兔 IgG
IL-1β (D3U3E) Rabbit mAb 12703 20 µl
  • WB
  • IF
  • F
 H 17, 31 兔 IgG
Cleaved-IL-1β (Asp116) (D3A3Z) Rabbit mAb 83186 20 µl
  • WB
  • IF
 H 17 兔 IgG
Caspase-4 Antibody 4450 20 µl
  • WB
 H 45 兔 
Caspase-5 (D3G4W) Rabbit mAb 46680 20 µl
  • WB
  • IP
 H 50, 44, 35 兔 IgG
HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb 6893 20 µl
  • WB
  • IHC
 H M R Mk 29 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
 Rab 山羊 

产品说明

Pyroptosis Antibody Sampler Kit 提供一种经济合算的方法来检测用于读取细胞焦亡的蛋白。该试剂盒包含的抗体足以使用每种一抗进行两次蛋白印迹实验。

特异性/灵敏度

BRD4 (E8G3F) Rabbit mAb 可检测内源水平的总 Gasdermin D 蛋白。该抗体可识别 caspase-1 在细胞焦亡期间产生的30 kDa 氨基末端片段、caspase-3产生的43kDa片段以及两个位点裂解产生的21 kDa 片段。Cleaved Gasdermin D (Asp275) (E7H9G) Rabbit mAb 可检测仅在 Asp275 被裂解活化的人 Gasdermin D 蛋白的氨基末端片段。Caspase-1 (D7F10) Rabbit mAb 可检测全长人 caspase-1 的内源水平以及通过过表达激活的 p20 亚基。Cleaved Caspase-1 (Asp297) (D57A2) Rabbit mAb 可检测 Asp275 裂解活化产生的人 caspase-1 的 p20 亚基。IL-1β (D3U3E) Rabbit mAb 可检测全长蛋白的内源水平，但无法检测成熟 IL-1β 的内源水平。它可检测多达 100 pg 的重组成熟 IL-1β。Cleaved IL-1β (Asp116) (D3A3Z) Rabbit mAb 可检测在 Asp116 被裂解活化的成熟 IL-1β 蛋白的内源水平。Caspase-4 Antibody 可检测总 caspase-4 以及 40 和 32 kDa 中间体形式的内源水平。Caspase-5 (D3G4W) Rabbit mAb 可检测 caspase-5 的内源水平。HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb 可检测总 HMGB1 的内源水平。它不会与其他 HMGB 蛋白发生交叉反应，包括 HMGB2 和 HMGB3。

来源/纯化

使用与人 Gasdermin D 中 Trp130 周围的残基以及与人 caspase-1 中 p20 亚基、人 caspase-1 中 Asp297、人 IL-1β 中 Asp116、人 caspase-5 中 Pro154 和人 HMGB1 中 Ala137 内的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用重组 IL-1β 蛋白对动物进行免疫接种来产生 IL-1β (D3U3E) Rabbit Mab。使用与人 caspase-4 蛋白中 Ile125 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。

背景

细胞焦亡是细胞死亡的一个受调控通路，具有坏死的形态特征，包括细胞肿胀、质膜孔隙形成以及炎性反应参与并释放多种损伤相关分子模式 (DAMP)，例如 HMGB1 与 IL-1β 和 IL-18 等炎性细胞因子 (1,2)。在有微生物病原体表达的病原体相关分子模式 (PAMP) 或细胞源性 DAMP 时，天然免疫系统的细胞（例如单核细胞、巨噬细胞和树突细胞）中通常会诱发细胞凋亡。诱发 caspase-1 蛋白水解激活的炎性体在组装后，会裂解 IL-1β 和 IL-18 等炎性细胞因子成为成熟形式，进而诱导细胞焦亡 (3)。细胞焦亡的一个关键特征是 Gasdermin D 被 caspase-1 和小鼠 caspase-11（或人 caspase-4/5）裂解 (4-6)。裂解时，Gasdermin D 的氨基末端片段低聚化形成一个允许分泌炎性 DAMP 和细胞因子的孔隙。典型的炎性体装配通常包含一个胞质模式识别受体 (PRR；一个核苷酸结合结构域和亮氨酸富集重复序列 [NLR] 或 AIM2 样家族成员）、一个接头蛋白 (ASC/TMS1) 和 pro-caspase-1。不同炎性体复合体可检测诱发细胞焦亡的不同 PAMP 和 DAMP。NLR 和 NLRP3 诱发的最具特征性的通路通过一个两步骤的过程发生。第一步是一个引发信号，NF-κB 被激活后会诱导一些炎性体组分的表达，包括 NLRP3、pro-IL-1β 和 pro-IL-18。在第二个激活步骤中，caspase-1 被激活且 Gasdermin D 和细胞因子通过蛋白水解被激活。在非典型通路中，caspase-4 和 caspase-5 会在 LPS 刺激后直接诱发单核细胞中的 Gasdermin D 裂解 (5,7)。

通路

探索与本品相关的通路。

有限使用

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