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77397
TGF-β Fibrosis Pathway Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合
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TGF-β Fibrosis Pathway Antibody Sampler Kit #77397

引用 (0)
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb #19245 对人结肠组织的提取物 (1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的单一靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
Simple WesternTM analysis of lysates (1 mg/ml) from THP-1 cells using YKL-40 (E2L1M) Rabbit mAb #47066. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。This experiment was performed under reducing conditions on the JessTM Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 12-230kDa.
使用 Phospho SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAb（上图）和总 Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb #5339（下图）对未经 (-) 或经 Human Transforming Growth Factor β3 (hTGF-β3)#8425（100 ng/ml，30 分钟）(+) 处理的 HaCaT 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 alpha-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 在 Leica® Bond™ Rx上对石蜡包埋的人子宫内膜样癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb（上图）和 GAPDH #5174（下图），对不同人、小鼠和大鼠组织的提取物进行蛋白质印迹分析。正如预期，骨骼肌样品的 α-平滑肌肌动蛋白表达呈阴性。
使用 TGF-β (56E4) Rabbit mAb 对重组活性 TGF-β1 进行蛋白质印迹分析。
使用 TGF-β Receptor II (E5M6F) Rabbit mAb（上图）、 Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278（中图）和 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174（下图）对转染空载或转染带 Myc/DDK 标记的 TGF-β 受体 I 蛋白（TGF-β 受体 I-Myc/DDK；+）或转染带 Myc/DDK 标记的 TGF-β 受体 II 蛋白（TGF-β 受体 II-Myc/DDK；+）的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 YKL-40 (E2L1M) 兔单克隆抗体（上图）和上样对照 α-辅肌动蛋白 (D6F6) XP® 兔单克隆抗体 #6487 对 THP-1 和 A-204 的提取物进行蛋白质印迹分析。正如预计的一样，A-204 细胞中的 YKL-40 表达较低且呈阴性。
使用 Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb #5339（上图）和 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487（下图）对 HeLa 细胞（泳道 1）或 SMAD2 敲除型细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白印迹分析。SMAD2 敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了抗体对 SMAD2 的特异性。
一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
使用 SMAD2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb 对来自 HeLa 细胞和 ACHN 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
在有或无 TGFR 抑制剂 SB 431542 的情况下，使用 Phospho-SMAD2 (Ser465/467)/SMAD3 (Ser423/425) (D27F4) Rabbit mAb（上图）或 SMAD2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb #8685（下图），对未经处理 (-) 或经过 hTGF-β3 #8425 (+) 处理的 HaCaT 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 COL1A1 (E8I9Z) XP® Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。
对经 Human Transforming Growth Factor β1 (hTGF-β1) #8915（10 nM，30 分钟）处理的 HaCaT 细胞的提取物磷酸化 SMAD2 (Ser465/Ser467) 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 Phospho-SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAb。使用 P-SMAD2 (Ser465/ Ser467) (E8F3R) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 用于检测，以避免与 IgG 具有的交叉反应性。
对小鼠结肠组织提取物 α-平滑肌肌动蛋白进行行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb。使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人阑尾细胞进行免疫组织化学分析。
使用 TGF-β (56E4) Rabbit mAb 对转染空载或转染 TGF-β1 前体的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 TGF-β Receptor II (E5M6F) Rabbit mAb（上图）和 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174（下图）对未经处理的或 经过 PNGase F (+) 处理的 Hep G2 和 HuH-7 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 YKL-40 (E2L1M) 兔单克隆抗体 对石蜡包埋的人肺鳞状细胞癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
对 HCT116 细胞提取物的 SMAD2/3 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为10% 输入，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 SMAD2/3 (D7G7) XP®。使用 SMAD2/3 (D7G7) XP® 进行蛋白质印迹分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb #3678 用作二抗。
对 U-118 MG 细胞提取物 COL1A1 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入对照，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 COL1A1 (E8I9Z) XP® Rabbit mAb。使用 COL1A1 (E8I9Z) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
使用 Phospho-Smad2 (Ser465/467) (E8F3R) Rabbit mAb（绿色）对未处理的（左图）、经 Human Transforming Growth Factor β3 (hTGF-β3) #8425（100 ng/mL，20 分钟；中间）处理，或经 hTGF-β3 处理后用 λ 磷酸酶处理（右图）的血清饥饿 HT-1080 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺导管细胞进行免疫组织化学分析。
使用 TGF-β (56E4) Rabbit mAb，对 K-562、Saos-2 与 786-0 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 YKL-40 (E2L1M) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人非霍奇金氏淋巴瘤细胞进行免疫组织化学分析。
使用 Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb（绿色）对血清饥饿（左图）或已经 hTGF-β3 #8425 处理（右图）的 NIH/3T3 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记（红色）。
使用 SMAD2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb（绿色）对血清饥饿（左图）、经 hTGF-β3 #8425（100 ng/ml，30 分钟，中图）处理或经 hTGF-β3 和 SB43152（10 ug/mL，1 小时，右图）处理的 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。
使用 Phospho-Smad2 (Ser465/467) (E8F3R) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对未处理的（蓝色）、经 Human Transforming Growth Factor β3 (hTGF-β3) #8425（100 ng/mL，30 分钟；绿色）处理，或经 SB43152（10 ug/mL，30 分钟）预处理后再用 hTGF-β3（100 ng/mL，30 分钟；红色）处理的血清饥饿 HT-1080 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 YKL-40 (E2L1M) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人卵巢浆液性乳头状癌细胞进行免疫组织化学分析。
Flow cytometric analysis of HeLa cells using SMAD2 (D43B4) XP® Rabbit mAb (solid line) compared to concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (dashed line). Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
与浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）比较，使用 SMAD2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb（实线）对 Hela 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor®488Conjugate) #4412 用作二抗。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对经 Human Growth Factor β1 #8915（7 ng/ml，1 小时）处理的 HaCaT 细胞的交联染色质与 Phospho-SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human ID1 Promoter Primers #5139、Human JunB Promoter Primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人非小细胞肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 YKL-40 (E2L1M) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的 THP-1 细胞沉淀物（左图，阳性）或 A-204 细胞沉淀物（右图，阴性）进行免疫组织化学分析。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 YKL-40 (E2L1M) Rabbit mAb（绿色）对 THP-1 细胞（左图，阳性）和 A-204 细胞（右图，阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封片。
Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from HaCaT cells treated with Human TGF-β3 #8425 (7 ng/ml) for 1 h and either Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb #5339 or Normal Rabbit IgG #2729 using SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005. 使用 SimpleChIP® Human CDKN1A Intron 1 Primers #4669、SimpleChIP® Human ID1 Promoter Primers #5139 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，以经 hTGF-β3 #8425（7 ng/ml，1 小时）处理的 HaCaT 细胞中的交联染色质和 SMAD2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示结合作用遍及 ID1（SMAD2/3 的已知靶标基因）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。欲知其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠小肠细胞进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，以经 hTGF-β3 #8425（7 ng/ml，1 小时）处理的 HaCaT 细胞中的交联染色质和 SMAD2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示结合作用遍及第 20号染色体（上图），包括ID1（SMAD2/3 的已知靶基因） （下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠骨骼肌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，以经 hTGF-β3 #8425（7 ng/ml，1 小时）处理的 HaCaT 细胞中的交联染色质和 SMAD2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀分析。使用 SimpleChIP® Human CDKN1A Intron 1 Primers #4669、SimpleChIP® Human ID1 Promoter Primers #5139 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded rhesus monkey kidney using alpha-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb.
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded rhesus monkey spleen using alpha-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb.
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb（绿色），对小鼠小肠（左图）和骨骼肌（右图）细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded rat colon using alpha-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb.

Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded rat brain using alpha-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb.

Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded Syrian hamster ovary using alpha-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb.
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded Syrian hamster uterus using alpha-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb.
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To Purchase # 77397T
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77397T		 1 个试剂盒（9 x 20 微升）

Bulk & Custom Formulation

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 19245 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
 H M R Hm Mk 42 兔 IgG
COL1A1 (E8I9Z) Rabbit mAb 91144 20 µl
  • WB
  • IP
 H 220 兔 IgG
SMAD2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb 8685 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
  • F
  • ChIP
 H M R Mk 52, 60 兔 IgG
SMAD2 (D43B4) XP® Rabbit mAb 5339 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
  • F
  • ChIP
 H M R Mk 60 兔 IgG
Phospho-SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAb 18338 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
  • F
  • ChIP
 H M R 60 兔 IgG
YKL-40 (E2L1M) Rabbit mAb 47066 20 µl
  • WB
  • IHC
  • IF
 H 30-40 兔 IgG
Phospho-SMAD2 (Ser465/467)/SMAD3 (Ser423/425) (D27F4) Rabbit mAb 8828 20 µl
  • WB
 H M R Mk 52, 60 兔 IgG
TGF-β (56E4) Rabbit mAb 3709 20 µl
  • WB
 H 12, 45-60 兔 IgG
TGF-β Receptor II (E5M6F) Rabbit mAb 41896 20 µl
  • WB
 H 85 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
 Rab 山羊 

产品说明

TGF-β 纤维化通路抗体小包装组合提供了一种经济的方法，用于研究细胞或组织中 TGF-β/ SMAD2/3 信号转导通路的激活，从而促使纤维化基因的表达，包括活化纤维细胞中 α-平滑肌肌动蛋白的表达，以及胶原 1A1、Col11A1 和 YKL-40 的上调。该试剂盒包含的抗体足以针对每种一抗进行至少两次蛋白质印迹实验。

特异性/灵敏度

α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 可识别内源水平的总 α-平滑肌蛋白。COL1A1 (E8I9Z) Rabbit mAb 可检测 COL1A1 总蛋白的内源水平。Smad2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb 可识别内源水平的 Smad2/3 总蛋白。Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb 可检测内源水平的 Smad2 总蛋白。该抗体不会与 Smad3 发生交叉反应。Phospho-Smad2 (Ser465/467) (E8F3R) Rabbit mAb 可识别在 Ser465 和 Ser467 处被磷酸化的 Smad2 蛋白的内源水平。YKL-40 (E2L1M) 兔单克隆抗体可检测 YKL-40 总蛋白的内源水平。Phospho-Smad2 (Ser465/467)/Smad3 (Ser423/425) (D27F4) Rabbit mAb 可识别内源水平的在 Ser465 和 Ser467 位点被磷酸化的 Smad2 蛋白。该抗体还能识别仅在 Ser422 位点被磷酸化或在 Ser423 和 Ser425 位点同时被磷酸化的内源水平的 Smad3 蛋白。TGF-β (56E4) Rabbit mAb 可识别重组 TGF-β1 与 TGF-β3 蛋白。该抗体也可检测内源水平的 TGF-β 前体蛋白。TGF-β Receptor II (E5M6F) Rabbit mAb 可识别 TGF-β 受体 II 总蛋白的内源水平。该抗体不与 TGF-β 受体 I 蛋白发生交叉反应。

来源/纯化

使用与人 α-平滑肌肌动蛋白中氨基末端周围的残基相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 COL1A1 蛋白 Phe1197 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 Smad2/3 蛋白中 His198 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与小鼠 Smad2 蛋白的氨基末端附近残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 Smad2 蛋白中 Ser465/467 周围残基相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人源 YKL-40 蛋白中氨基末端周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 Smad2 蛋白中 Ser465/467 周围残基相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 TGF-β1 蛋白的羧基末端区域残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用人 TGF-β 受体 II 蛋白氨基末端特异性重组蛋白对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

转化生长因子-β (TGF-β) 超家族成员为细胞增殖、分化、发育模式决定与形态发生，以及疾病病理发生过程的重要调节分子 (1-4)。在纤维化的背景下，SMAD2/3 的 TGF-β 信号转导 是促进纤维化程序的最大驱动因素（5）。

TGF-β 通过三种细胞表面受体：I 型 (RI)、II 型 (RII) 与 III 型 (RIII) 进行信号转导。为了响应配体结合，II 型受体与 I 型受体形成稳定的异二聚体复合体，以便于 I 型受体激酶进行磷酸化和激活 。活化型 I 受体与 SMAD2/3 有关，并且可在保守的羧基末端 SSXS 模序磷酸化它们。磷酸化的 SMAD 从受体上分离，并产生带 co-Smad (Smad4) 的异二聚体复合体，使得复合体移位至胞核。进入胞核后，磷酸化的 SMAD2/3 靶向 DNA 结合蛋白的一个子集，以调节转录程序（6-8）。

在纤维化的背景下，SMAD2/3 激活会上调促纤维化基因的表达，例如 COL1A1 和其他修饰组织细胞外基质的 ECM 调节剂。(9). TGF-β/ Smad2/3 信号转导还诱导纤维细胞中的 α-Smooth 肌动蛋白表达，从而导致这些细胞转化成肌成纤维细胞（10）。肌成纤维细胞进一步修改 ECM，从而导致胶原蛋白和其他 ECM 组分积聚过多。组织受伤可吸引巨噬细胞和其他免疫细胞，并且纤维化组织很快成为炎症部位（11）。在这种促纤维化、促炎性的环境中，会分泌 YKL-40（也称为 Chitinase-3-like protein 1 (CHI3L1)）。YKL-40 是一种促炎性糖蛋白，也有助于纤维化的进展（12）。胶原蛋白含量、α-平滑肌肌动蛋白的测定以及 YKL-40 的释放可预测纤维化活性。

通路

探索与本品相关的通路。

有限使用

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Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
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