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8343
Jak/Stat Pathway Inhibitors Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Jak/Stat Pathway Inhibitors Antibody Sampler Kit #8343

引用 (3)
使用 PIAS1 (D33A7) XP® Rabbit mAb(绿色)、DyLight 650 Phalloidin #12956(红色)和 DAPI #4083(蓝色)对 AGS 细胞(左图,高表达)和 SW480 细胞(右图,低表达)进行共聚焦免疫荧光分析。
使用 SOCS2 Antibody 对 K562、A204 和 PC12 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 PIAS1 (D33A7) XP® Rabbit mAb 对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 PIAS4 (D2F12) Rabbit mAb 对 来自 293 和 CCRF-CEM 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 SOCS3 (D6E1T) 兔单克隆抗体(上图)或 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体#8457(下图)对未经 (-) 或已经 Human Oncostatin M #5367(hOSM;20 ng/ml,1 小时;+)处理的 Hep G2 和 A-375 细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。
使用 SOCS1 (E3Q4M) Rabbit mAb(上图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。U266B1 细胞中无 SOCS1 信号被发现是由 SOCS1 的异常超甲基化所造成,并证实抗体对 SOCS1 的特异性。
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
使用 PIAS3 (D5F9) XP® Rabbit mAb(上)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下)对使用 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® PIAS3 siRNA I #9073 (+) 或 SignalSilence® PIAS3 siRNA II #9031 (+) 转染的 RD 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。PIAS3 (D5F9) XP® Rabbit mAb 确认了 PIAS3 表达的沉默,而 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb 则被用作上样对照。
使用 PIAS1 (D33A7) XP® Rabbit mAb(绿色)对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。
使用 SOCS3 (D6E1T) 兔单克隆抗体对转染空载 (-) 或转染表达全长人 SOCS3 (+) 的表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
使用 SOCS1 (E3Q4M) Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对未经处理或经mINFα(10ng/ml,24 小时)处理的各种细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 PIAS3 (D5F9) XP® Rabbit mAb 对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 PIAS1 (D33A7) XP® Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype control #3900(虚线)对 KARPAS 299 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
使用 SOCS3 (D6E1T) 兔单克隆抗体(上图)或 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体(下图)对未经 (-) 或已经 Jak3 抑制剂 WHI-P154(40 μM,过夜;+)处理的 KARPAS-299 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。KARPAS 细胞系来源:剑桥大学的 Abraham Karpas 博士。
使用 SOCS1 (E3Q4M) Rabbit mAb(上图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对转染空载 (-) 或转染表达带有 Myc/DDK 标签的全长人 SOCS1 蛋白(hSOCS1-Myc/DDK;+)的表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
使用 PIAS3 (D5F9) XP® Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或用构建表达的全长人 PIAS3 (hPIAS3; +) 转染的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 SOCS3 (D6E1T) 兔单克隆抗体(上图)或 GAPDH (D16H11) XP® 兔单克隆抗体#5174(下图)对未经 (-) 或已经 Lipopolysaccharides #14011(LPS;50 ng/ml,4 小时;+)处理的小鼠骨髓源性巨噬细胞 (mBMDM) 的细胞提取物进行蛋白印迹分析。
对 L-540 细胞提取物 SOCS1 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 SOCS1 (E3Q4M) Rabbit mAb。使用 SOCS1 (E3Q4M) Rabbit mAb 进行蛋白印迹分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 用作二抗。
使用 PIAS3 (D5F9) XP® Rabbit mAb(绿色)对 A-204(阳性,左)和 Hep G2(低表达,右)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。
To Purchase # 8343T
目录# 规格 价格 库存
8343T
1 个试剂盒(6 x 20 微升)

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
SOCS1 (E3Q4M) Rabbit mAb 55313 20 µl
  • WB
  • IP
H M R Mk 23 兔 IgG
SOCS2 Antibody 2779 20 µl
  • WB
  • IP
H M R 22 兔 
SOCS3 (D6E1T) Rabbit mAb 52113 20 µl
  • WB
H M 28 兔 IgG
PIAS1 (D33A7) XP® Rabbit mAb 3550 20 µl
  • WB
  • IF
  • F
H M R Mk 76 兔 IgG
PIAS3 (D5F9) XP® Rabbit mAb 9042 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
H 65-75 兔 IgG
PIAS4 (D2F12) Rabbit mAb 4392 20 µl
  • WB
H R Mk 75 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
Rab 山羊 

产品说明

使用 Jak/Stat Pathway Inhibitors Antibody Sampler Kit,能够以经济的手段检测 Jak/Stat 信号转导的几种抑制剂,包括 PIAS1、PIAS3、PIAS4、SOCS1、SOCS2 和 SOCS3。该试剂盒包含足够的一抗,每个一抗可进行两次蛋白质印迹法实验。

特异性/灵敏度

本试剂盒中每种抗体只能检测特异性靶标蛋白而不会与其他家族成员交叉反应。

来源/纯化

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues at the carboxy terminus of human SOCS2 protein, or recombinant protein specific to human SOCS3 protein. 使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。Monoclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Ser550 of human PIAS1 protein, Pro590 of human PIAS3 protein, Lys59 of human PIAS4 protein, or near the carboxy terminus of human SOCS1 protein.

背景

Jak(Janus 激酶) 和 Stat(信号转导蛋白和转录激活剂)蛋白被多种配体的受体所使用,其中包括细胞因子、激素、生长因子和神经递质 (1)。Jaks 和 Stats 在癌基因、肿瘤进展、血管生成、细胞运动、免疫应答和干细胞分化中具有重要作用 (2-5)。因此,Jak/Stat 信号转导的调节对防止导致疾病进展的异常信号转导非常重要。调节 Jak/Stat 信号转导的两种方法涉及 SOCS 和 PIAS 蛋白 (6,7)。SOCS(抑制因子或细胞因子信号转导)家族成员是细胞因子信号转导的负调节分子,可抑制 Jak/Stat 通路并且包含8 已知成员,包括最初确定的蛋白 CIS1(含细胞因子诱导型 SH2 蛋白)和 SOCS1-SOCS7。每个 SOCS 家族成员包含一个 SH2 中心域和称为 SOCS 盒的保守羧基末端基序。这些蛋白是细胞因子信号转导、增殖、分化和免疫应答的重要调节分子 (8-10)。SOCS 蛋白参与调节 30 种细胞因子,包括白介素、生长激素 (GH)、干扰素、瘦素和白血病抑制因子 (7)。SOCS1 也称 JAB(Janus 激酶结合蛋白)和 SSI-1(Stat 诱导的 Stat 抑制剂-1),与 SOCS3 的同源性最大,两者均受细胞因子的高度诱导 (7,11)。SOCS1 和 SOCS3 直接抑制 Jak 活性;SOCS1 通过位于激酶激活环中的磷酸酪氨酸的相互作用抑制 Jak,而 SOCS3 则通过其 SH2 结构域抑制 Jak (12,13)。除了抑制 Jak/Stat 信号转导外,SOCS1 和 SOCS3 的 SOCS 盒还可以触发泛素介导的Jak / Stat 通路内外的蛋白降解 (14,15)。SOCS2 还可以在细胞因子刺激下受到诱导,并且 SOCS2 的活性主要与 GH 和胰岛素样生长因子相关联

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  21. Zhou, S. et al. (2008) J Biol Chem 283, 20137-48.

通路

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