查看特别推荐 >>
98110
Necroptosis Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合
  1. 产品
  2. 一抗
  3. Necroptosis Antibody Sampler Kit

Necroptosis Antibody Sampler Kit #98110

引用 (7)
使用 Phospho-RIP (Ser166) (D1L3S) Rabbit mAb #65746 对经过 ZVAD（20uM，7.5 小时）+ hTNF-α（20ng/mL，7 小时）+ SM-164（100nM，7 小时）处理的 HT-29 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
使用 RIP3 (E1Z1D) Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 MLKL (D2I6N) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。KARPAS 细胞系来源：剑桥大学的 Abraham Karpas 博士。
使用 RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb 对未转染或转染人 RIP 表达载体的 Hela 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Phospho-RIP (Ser166) (D1L3S) Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对未经处理 (-) 或经过如下所示的处理组合方法处理的 HT-29 细胞进行蛋白质印迹分析：Z-VAD（20 μM，先于其他混合物 30 分钟添加；+）、人 TNF-α（hTNF-α，20 ng/ml，7 小时；+）、SM-164（100 nM，7 小时；+）和 necrostatin-1（Nec-1，50 μM，7 小时；+）。
一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
使用 Phospho-MLKL (Ser358) (D6H3V) Rabbit mAb（上图）或 MLKL (D2I6N) Rabbit mAb #14993（下图）对未经处理 (-) 或经过如下所示的处理组合方法处理的 HT-29 细胞进行蛋白质印迹分析：Z-VAD（20 μM，先于其他混合物 30 分钟添加；+）、人 TNF-α（hTNF-α，20 ng/ml，7 小时；+）、SM-164（100 nM，7 小时；+）和 necrostatin-1（Nec-1，50 μM，7 小时；+）。
使用 Phospho-RIP3 (Ser227) (D6W2T) Rabbit mAb 对未经处理 (-) 或经过如下所示的处理组合方法处理的 HT-29 细胞进行蛋白质印迹分析：Z-VAD（20 μM，先于其他混合物 30 分钟添加；+）、人 Tumor Necrosis Factor-α #8902（hTNF-α，20 ng/ml，7 小时；+）、SM-164（100 nM，7 小时；+）。膜不用（左图）或用牛小肠磷酸酶处理（CIP；右图），以确定磷酸特异性。
使用 RIP3 (E1Z1D) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或转染全长人 RIP3 蛋白 (hRIP3; +) 表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 MLKL (D2I6N) Rabbit mAb （上）或 Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278（下），对转染空载 (-) 转染 Myc/DDK 标签的全长人 MLKL 蛋白表达载体 (hMLKL-Myc/DDK；+) 的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb（绿色）对 OVCAR8 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
使用 Phospho-RIP3 (Ser227) (D6W2T) Rabbit mAb（上图），RIP3 (E1Z1D) Rabbit mAb #13526（中图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对未经处理 (-) 或经过如下所示的处理组合方法处理的 HT-29 细胞进行蛋白质印迹分析：Z-VAD（20 μM，先于其他混合物 30 分钟添加；+）、人 Tumor Necrosis Factor-α #8902（hTNF-α, 20 ng/ml，7 小时；+）、SM-164（100 nM，7 小时；+）和 necrostatin-1（Nec-1，50 μM, 7小时；+）。
使用 RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb（实线）或 浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对对照型 MEF 细胞（绿色）或 RIP 敲除型 MEF 细胞（蓝色）进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
使用 Phospho-RIP3 (Ser227) (D6W2T) Rabbit mAb（上图）、RIP3 (E1Z1D) Rabbit mAb #13526（中图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对未经处理 (-) 或经过以下所示的处理方法组合处理的 HT-29 细胞 或 HT-29 RIPK1 KO 细胞进行蛋白质印迹分析：Z-VAD （20 μM，先于其他化合物之前 30分钟添加；+）、Human Tumor Necrosis Factor-α #8902（hTNF-α，20 ng/ml，7 小时；+） 和 SM-164（100 nM，7 小时；+）。HT-29 RIPK1 KO 细胞由马萨诸塞州波士顿哈佛大学医学院的 Junying Yuan 博士惠赠。
使用 RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb #3493 对 Ramos 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的单一靶标条带（如图所示）。相应的电泳图视图（右图）描绘了一抗稀释比例为 1:50（绿色线）和 1:250（蓝色线）时沿毛细血管的按分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
使用 Phospho-RIPK3 (Ser227) (D6W2T) Rabbit mAb（绿色）对未处理的（左图）、经 Z-VAD（20 μM，30 分钟）预处理后再经 SM-164 (100 nM) 和 Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902（20 ng/mL，6 小时；中间）处理，或经 Z-VAD 预处理后再经 SM-164 和 hTNF-α 处理，随后经 λ 磷酸酶后处理（右图）的 HT-29 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
图像库
更多了解我们如何获得图像
To Purchase # 98110T
目录# 规格 价格 库存
98110T		 1 个试剂盒（6 x 20 微升）

Bulk & Custom Formulation

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb 3493 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
  • F
 H M R Hm Mk 78 兔 IgG
Phospho-RIP (Ser166) (D1L3S) Rabbit mAb 65746 20 µl
  • WB
 H 78-82 兔 IgG
MLKL (D2I6N) Rabbit mAb 14993 20 µl
  • WB
 H 54 兔 IgG
Phospho-MLKL (Ser358) (D6H3V) Rabbit mAb 91689 20 µl
  • WB
 H 54 兔 IgG
RIP3 (E1Z1D) Rabbit mAb 13526 20 µl
  • WB
  • IP
 H 46-62 兔 IgG
Phospho-RIP3 (Ser227) (D6W2T) Rabbit mAb 93654 20 µl
  • WB
  • IF
 H 46-62 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
 Rab 山羊 

产品说明

Necroptosis Antibody Sampler Kit 是一种经济合算的方法，可用来检测与坏死性凋亡有关的总蛋白和磷酸化蛋白。该试剂盒包含的抗体足以针对每种一抗进行两次蛋白质印迹实验。

特异性/灵敏度

Necroptosis Antibody Sampler Kit 中的每种抗体均可检测其内源水平的靶标蛋白。MLKL (D2I6N) Rabbit mAb 会与某些细胞系中的 130 kDa 的未鉴定条带发生交叉反应。Phospho-MLKL (Ser358) (D6H3V) Rabbit mAb 还会与在 Thr357 和 Ser358 位点被双重磷酸化时，与 MLKL 结合。

来源/纯化

使用与人 RIP 的 Leu 190（人 RIP3 羧基端附近残基）相对应的合成肽对兔进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 RIP 的 Ser166、人 RIP3 的 Ser227 和人 MLKL 蛋白 Ser358 的相对应的合成磷酸肽，对兔进行免疫接种来产生磷酸特异性单克隆抗体。

背景

坏死性凋亡是一个坏死性细胞死亡的调控通路，肿瘤坏死因子 (TNF) 家族的细胞因子、病原体感应蛋白（如 toll 样受体 (TLR)）和缺血性损伤以及神经退行性疾病等许多炎症信号都会诱发坏死性凋亡 (1-3)。这个过程由 caspase 负调控，并由含有 RIP 和 RIP3 激酶的复合体（通常称为坏死体）启动。RIP 的小分子抑制因子 necrostatin-1 (Nec-1) 会抑制坏死性凋亡 (4)。RIP 在激酶结构域中对 Nec-1 敏感的多个位点被磷酸化，这些位点包括 Ser14、Ser15、Ser161 和 Ser166 (5)。在坏死性凋亡中，RIP3 在 Ser227 位点被磷酸化，这会募集 MLKL 并导致其在 Thr357 和 Ser358 位点的磷酸化 (6)。MLKL 磷酸化会导致其低聚化并转位到质膜，从而影响膜完整性 (7-10)。

通路

探索与本品相关的通路。

有限使用

除非如以 CST 合法授权代表签署的书面形式另行明确同意，否则以下条款适用于 CST、其附属公司或其分销商提供的产品。除非 CST 合法授权代表以书面形式单独接受，否则任何附加于或异于此处所载条款和条件的客户条款和条件均被拒绝且无效。

产品用“仅供研究使用”或类似标示声明标示，并且尚未经 FDA 或其他国外或国内监管实体出于任何目的批准、准许或许可。客户不得出于任何诊断或治疗目的或以任何与产品标示声明相冲突的方式使用任何产品。CST 销售或许可的产品提供给作为最终用户的客户，且仅用于研究和开发用途。出于诊断、预防或治疗目的任何产品使用或出于转售（单独或作为成分）或其他商业目的的任何产品购买都要求来自 CST 的单独许可。客户 (a) 不得向任何第三方出售、许可、出借、捐赠或另行转让或提供任何本公司产品，无论单独或联合其他材料方式，或使用本公司产品制造任何商业产品，(b) 不得复制、修改、逆向工程、反编译、反汇编或另行尝试发现本公司产品的底层结构或技术，或出于开发与 CST 产品或服务竞争的任何产品或服务的目的使用本公司产品，(c) 不得从本公司产品改变或移除任何商标、商品名称、徽标、专利或版权声明或标记，(d) 仅应根据 CST 产品销售条款和任何适用文档使用本公司产品，以及 (e) 应就客户联系本公司产品所用的任何第三方产品或服务而言遵守任何许可、服务条款或类似协议。

仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
XP 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
所有其他商标均属各自所有者专有。访问我们的商标信息页面。